郝明志细胞免疫疗法治疗2010肿瘤内科大会技术总结.ppt

 体外实验证实，人DC至少有三条来自于不同前体细胞的发育途径： 1）CD34+细胞分化为DC 2）外周血单核细胞分化为DC 3）淋巴样DC前体细胞分化途径  我们比较了人外周血单核细胞及脐血CD34+细胞诱导DC的方法及其特性。 ---外周血单核细胞在因子GM-CSF、IL-4、TNF-?等诱导下，分化为DC， ---脐血CD34+细胞在GM-CSF、IL-4、 TNF-?、SCF、FL、TPO等因子作用下，可生成DC， 表达相应的分化抗原CD1a、CD80、CD83、CD86、HLA-DR，并具有诱导CTL的功能。 人外周血单核细胞和脐血CD34+细胞来源的树突状细胞比较 福建医科大学学报 2003，37（2） DC在 肝癌治疗中 作用途径 细胞水平： 肝癌裂解物、凋亡的肝癌细胞可致敏DC， 回输体内,有效诱发机体的抗肝癌免疫应答 。该方法简单易行,可激发针对多个肝癌抗原的 T淋巴细胞免疫,减少了癌细胞逃逸的可能性。 灭活的肝癌细胞可与DC融合，使肿瘤抗原可直接在融合细胞内被加工呈递 ,保证了抗原的完整有效及充分呈递。 蛋白水平： 将 DC与肝癌相关抗原肽或肝癌可溶性抗原在体外共同孵育,使肝癌抗原肽结合在 DC表面的 MHC2Ⅱ类分子上,再回输体内,可以引起较强的 CD4 和CD8 的 T细胞免疫以治疗肝癌。 基因水平： 肿瘤抗原基因可通过重组腺病毒载体、逆转录病毒载体、痘病毒载体或直接以裸 DNA或 RNA方式导入 DC,再免疫机体。  由于大多数肿瘤抗原未被识别，因此肿瘤细胞溶解物负荷的DC疫苗可使更多的患者接受此种方法治疗。 DC-CIK治疗 DC和CIK是肿瘤免疫治疗的两个重要部分,前者识别抗原、激活获得性免疫系统,后者通过发挥自身细胞毒性和分泌细胞因子杀伤肿瘤细胞,二者联合确保了一个高效和谐的免疫体系。 DC和CIK共同培养后具有更强的肿瘤杀伤活性,杀瘤谱更广,并且还能在低效靶比条件下清除肿瘤细胞。  DC介导的抗肿瘤免疫治疗具有很大的潜力 ,但目前进行的工作还处于探索阶段： ---如何增强 DC疫苗的免疫效果 ---肿瘤抗原的选择、剂量的确定 ---输注途径 ---最佳疫苗剂量 ---疫苗接种时间间隔等  在异基因的造血干细胞移植（Allo-HSCT）中观察到混于干细胞或由干细胞生成的免疫细胞能够产生有力的移植物抗肿瘤（GVT）效应。 这种通过同种异基因免疫细胞的输注或干细胞的移植来介导肿瘤的免疫反应的治疗方法称肿瘤的异基因免疫治疗，也是一种过继免疫治疗。 李晓峰，陈强. 肿瘤异基因免疫治疗研究现状. 福建医科大学学报 2005;39:64-66 五、非清髓性异基因免疫治疗 （HLA半相合免疫细胞治疗）  原理：低剂量或常规剂量的化疗预处理，使患者的免疫功能没有受到充分的抑制，尚存的T细胞和NK细胞可攻击MHC不相合的供者细胞，通过HVGR把供者细胞清除了； 而单倍体相合的供者细胞由于被受者兼容，尚存的受者细胞不会攻击供者细胞，不产生HVGR。但供者T细胞和NK细胞可以攻击宿主，依靠移植物抗肿瘤（GVT）作用产生一系列的免疫反应。 林浩，叶韵斌，李晓峰，等，单倍体相合细胞移植诱发小鼠移植物抗肿瘤效应的分析，中国组织工程研究与临床康复，2008；12（3） 动物试验 单倍体相合细胞移植的GVT（移植物抗肿瘤瘤）效应。 探索保留GVT效应、减轻GVHD反应的方法 移植方式 建立BABL/C╳C57BL/6杂交F1代小鼠H22肝癌实体瘤模型，以C57BL/6为供者，F1为受者。 受者分为化疗预处理和无化疗预处理者。 无化疗预处理小鼠则于接种H22肿瘤细胞后第3天开始腹腔注射NS，8ul/(kg.d)，连续4天 。 化疗预处理的方案为：接种H22肿瘤细胞后第3天开始对荷瘤F1小鼠进行环磷酰胺（CTX）腹腔化疗，以生理盐水将环磷酰胺稀释成10mg/ml，80mg/(kg.d)腹腔注射，连续注射4天。 瘤重和抑瘤率 组别 N 瘤重（g） 抑瘤率(%) 单化疗无移植 6 1.3017±.54020 -- 全相合 6 1.1600±.67326 10.89 不相合 6 0.9483±.53875 27.15 未照射单倍体相合 经照射单倍体相合 6 0.5917±.48758 1） 54.54 6 0.2717±.29404 2）3） 79.13 ** 1）与单化疗无移植组比：P0.05；2）与单化疗无移植组比：P0.01；3)与未照射单倍体相合组比P0.05。 陈强，李晓峰，叶韵斌，等。MHC半相合脾加骨髓细胞诱发