课件大孔吸附树脂技术.pptVIP

七、 大孔吸附树脂应用中存在的问题及解决办法 尽管大孔树脂纯化技术是中药制药工业中颇具发展前景的实用新技术之一，但它在中药及其复方制剂的分离精制方面尚存在一些问题，如纯化条件的规范性、应用于复方中药的等效性、技术评价的科学性以及安全性等。因此，我们还应进一步加强有关基础工作的研究，进一步规范工艺条件，进一步完善相关标准和法规，使大孔树脂纯化技术成为推动中药现代化的重要而有效的手段。 (一) 纯化条件的规范 为使树脂分离条件合理用于中药的纯化，在理论与实践中不断完善，保证研制的新药安全、可靠、有效，在实际应用中，应根据分离纯化对象和树脂分离纯化工序规范树脂的纯化工艺技术。 1 树脂前处理与树脂再生的合理方法和合格标准 (1)树脂的前处理及检查方法 ①有机物限量的检查 对于不挥发性有机残留物的检查，可参照美联邦条例第170—199部分3卷21条(1998年修订)，以洗脱液中有机残留物总量(重量法)为指标，进行限量检查。具体方法为：用蒸馏水、95％乙醇、5％乙酸以350～400ml／h的流速依次洗脱处理，弃去1L初洗液，收集2L续洗液，挥干，于105摄氏度干燥至恒重，称定质量(浸出物重)，再于850摄氏度灼烧至完全灰化且恒重后，称定质量(灰分质量)，此前后两次质量之差即为有机物残留量。 ②残留物限量的检查 方法一，将树脂研成细粉，加入一定量乙醇振摇数次，弃去乙醇，再加三倍量乙醇反复浸泡，至等量纯水不浑浊。 方法二，对于苯、甲苯、二甲苯等含共轭双键的残留物，可用紫外吸收作为指标进行检查。 方法三，可利用气相色谱法检查挥发性残留物。如D101型大孔树脂苯系列残留物的分析研究中，用气相色谱法，以二乙烯苯含量为指标，从动、静两种状态出发，用乙醇、酸、碱处理至无残留物检出为止。 取D1300树脂100ml置树脂床上，加入浓度为0.51g/ml的药液，并控制药液上样流速为24／1000(V/min，V为树脂床体积)，径高比为1:40，每2.0ml收集一份，薄层检测后，选择不同馏分定量测定右归煎液中有效成分5-HMF(5-HMF为方中熟地黄成分)斑点的峰面积，见图1，泄漏曲线见图2。 扫描结果显示，第111分峰面积高于110分峰7.48倍，明显表现出泄露现象，按每2.0mL计算，总上样体积220.0mL相当于110.0g生药量，由计算公式： 树脂吸附容量＝泄露点前上柱样品体积(m1)X样品浓度(mg／L) 可得出该树脂对右归煎液的吸附容量，即每lml树脂最大吸附量为1.10g生药。 2. 药液上柱前的预处理 为避免大孔树脂被污染堵塞，药液上柱前一般需经过滤，除去较多的悬浮颗粒杂质，保证树脂的使用完全、顺利。 3 . 上柱工艺条件的筛选 ①影响树脂吸附性能的因素有诸多方面，其中最基本的是树脂自身因素，包括树脂的]骨架结构、功能基性质及其极性等。此外，样品浓度、pH、吸附柱径高比及上样流速等条件，均不同程度地影响树脂的吸附性能。 ②上样溶液pH值对吸附和分离效果至关重要，根据化合物结构特点，灵活改变溶液pH值，可使提纯工作达到理想效果。一般情况下，酸性化合物在适当酸性溶液中充分被吸附，碱性化合物则在适当碱性条件下较好地被吸附，中性化合物可在大约中性的条件下被吸。 ③药液浓度、流速及树脂柱径高比等因素也直接影响了大孔吸附树脂的吸附性能。 四、 树脂的解吸 解吸时，通常先用水，继而以醇—水洗脱，逐步加大醇的浓度，同时配合适当理化反应和薄层层析(如硅胶薄层层析、纸层析、聚酰胺薄层层析及HLPC等)作指导，洗脱液的选择及其浓度、用量对解吸效果有着显著影响。如在赤芍总苷生产工艺条件研究时发现，在用大孔吸附树脂进行分离、解析时，先用水洗脱至还原糖反应显阴性(Molish反应检测)，改用10％、20％、30％、50％、95％浓度的乙醇梯度洗脱，结合高效液相色谱法检测，发现10％、20％乙醇洗脱液中均含有芍药苷，而30％以上浓度的乙醇中未检出，故选用30％乙醇洗脱，即可将柱上的芍药苷全部解吸。 又如对银杏叶提取物的生产工艺条件进行研究，发现最开始用水，后来用醇洗脱时，洗脱液的用量、浓度均对产品中黄酮含量和收率有影响。 对于复方样品，为防止同类化合物不同结构物质的漏洗，应选择适当的洗脱液，并有相关的方法加以检测和证明，如50％乙醇对小檗碱洗脱率为96.86％，但不能将同时存在的延胡素乙素洗脱解吸下，故复方中含同类成分不同结构的物质，宜用不同洗脱剂解吸。洗脱液可使用甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯。根据吸附力强弱选用不同的洗脱剂及浓度。 对非极性大孔树脂，洗脱剂极性越小，洗脱能力越强；对于中性大孔树脂和极性较大的化合物来