固相萃取技术.pptVIP

固相萃取法是用固体物质作为萃取剂从样中提取某些组分的方法。该法通常采取柱分离，所用柱称为SPE柱，它是由柱管、筛垫、固定相三部分组成的。其中，固定相是SPE柱中起分离作用的部分。SPE是一种吸附萃取，主要是用于水中组分的处理，当水中痕量待测物质通过装有合适吸附剂的SPE柱时被富集，若样品中的待测组分不超过吸附容量时则被全部保留下来，再被少量的选择性溶剂洗脱。因而，SPE是同时进行萃取和浓缩的有效方法。 2-2、固相萃取的分离模式 SPE特别适合远距离采集样品的处理,采样后立即进行固相萃取,使待测组分吸附在固相上,不但可缩小样品体积,减少了运输的麻烦,更主要的是吸附在固相上的组分往往比存放在冰箱内的样品更稳定,不易受光、热、微生物的作用发生各种化学、物理的变化。 SPE分离模式可分为正相(吸附剂极性大于洗脱液极性)、反相(吸附剂极性小于洗脱液极性)、离子交换和吸附。其作用机理包括氢键、偶极作用、疏水性相互作用和静电吸引力等。 2-3、固相萃取的操作步骤 1、固相萃取的预处理 一是为了润湿和活化固相萃取填料，二是为了除去填料中可能存在的杂质，减少污染。 采取的方法是用一定量溶剂冲洗萃取柱。 反相类型的固相萃取硅胶和非极性吸附剂介质，通常用水溶性有机溶剂如甲醇预处理，然后用水或缓冲溶液替换滞留在柱中的甲醇。 正相类型的固相萃取硅胶和极性吸附剂介质，通常用样品所在的有机溶剂来预处理。 离子交换填料一般用3～5mL去离子水或低浓度的离子缓冲溶液来预处理。 固相萃取填料从预处理到样品加人都应保持湿润，如果在样品加人之前，萃取柱中的填料干了，需要重复预处理过程。 2、上样 将样品倒入活化后的SPE小柱，然后利用加压、抽真空或离心的方法使样品进入吸附剂。采取手动或泵以正压推动或负压抽吸方式，使液体样品以适当流速通过固相萃取柱，此时，样品中的目标萃取物被吸附在固相萃取柱填料上。 2、上样图示 3、洗去干扰物质 目的是为了除去吸附在固相萃取柱上的少量基体干扰组分。 一般选择中等强度的混合溶剂，尽可能除去基体中的干扰组分，又不会导致目标萃取物流失。 反相萃取体系常选用一定比例组成的有机溶剂-水混合液，有机溶剂比例应大于样品溶液而小于洗脱剂溶液。 4、洗脱及收集分析物 选择适当的洗脱溶剂洗脱被分析物，收集洗脱液，挥干溶剂以备后用或直接进行在线分析。 为了尽可能将分析物洗脱，使比分析物吸附更强的杂质留在SPE 柱上，需要选择强度合适的洗脱溶剂。 三、固相萃取基本装置 固相萃取的基本装置包括固相萃取柱和固相萃取过滤装置。固相萃取柱是整个固相萃取装置的核心。 （1）固相萃取柱 商品化的固相萃取柱（cartridge）外形类似于一个注射器针筒。还可自行填装固相萃取柱。 （2）固相萃取过滤装置 固相萃取加样过程中，需通过适当的方法使样品溶液通过固相萃取柱，使待分析物吸附在填料上。洗脱过程中，同样需要使溶剂通过固相萃取住，使待分析物解析。以上步骤需借助于固相萃取过滤装置完成，采用柱前加压或柱后加负压抽吸的方式实现。 a、固相萃取过滤-加压操作 固相萃取加压操作可通过在液体样品储液槽上方用高压空气或氮气施加一定压力来实现的。如果样品较少，可以用手动加压的方式实现。 b. 固相萃取过滤-负压抽吸 c. 固相萃取过滤-离心法 全自动固相萃取仪 固相萃取联用装置 四、固相萃取在环境中的应用 近年来随着化学工业的发展和农药的大量使用导致自然环境中某些水体、土壤、大气和生物体中有机污染物超过法定限量。另一方面随着人们环境意识的提高，对环境中有机污染物的控制越来越严格，要求检测技术更加快速方便、灵敏可靠。因此，固相萃取已广泛应用于环境分析，为环境分析工作者提供一种较为理想的前处理技术以代替传统的提取、净化和浓缩方法。 环境水中有机污染物分析 固相萃取作为一种新型的样品处理技术已广泛用于水中有机污染物的痕量富集。20世纪80年代，在我国的松花江、黄浦江、太湖等的水质监测中已较广泛采用了SPE技术(测定卤代烃、含氯农药、氯苯、氯酚、苯胺、硝基物、多氯联苯、多环芳烃和酞酸酯等）。 固相萃取技术富集水中的多环芳烃 多环芳烃是在自然界中广泛存在的一种有机污染物,其中某些化合物具有相当强的致癌或致突变作用。在各种水体中几乎都存在，但它们在水中含量低,种类多,因而，快速而准确地对其定性、定量一直是分析化学的前沿研究领域。 1、仪器与试剂 12个样位的固相萃取装置; 液相色谱系统:HP1050泵,HP1046荧光检测器,LC-PA