液相色谱仪20120226.pptVIP

案例分析一 案例一：天麻素的高效液相色谱分析 天麻为兰科植物天麻Gastrodia elata Blume的干燥块茎。是一味常用而较名贵的中药，临床多用于头痛眩晕、肢体麻木、小儿惊风、癫痫、抽搐、破伤风等症。天麻过去一直依赖野生资源，20世纪70年代野生变家种成功后，家种天麻成为主要商品来源。有效成分为天麻素。 利用高效液相色谱法测定天麻素的含量。 案例分析一 分析条件 液相色谱仪: Agilent 1200 ; 配置：四元梯度泵，DAD检测器，柱温箱，自动进样器。 色谱柱： Agilent Zorbax SB-Aq,250×4.6cm，5μm； 检测波长：220nm； 进样量：10μl； 柱温：28.0℃； 流动相：乙腈：0.05%磷酸溶液= 3 : 97 案例分析一 案例分析一 案例分析二 甘草苷的高效液相色谱分析 甘草为豆科植物甘草Glycyrrhiza uralensis Fisch 的干燥根及根茎。是一味补益中草药，功能主治：补脾益气，清热解毒，祛痰止咳，调和诸药。甘草的主要成分是甘草酸（glycyrrhizic acid），分子式C42H62O16。又称甘草甜素。为甘草次酸的二葡萄糖醛苷（见苷），是甘草的甜味成份。它具有抗炎、抗病毒，和保肝解毒及增强免疫功能的作用。临床被广泛用于治疗各种急慢性肝炎、支气管炎和艾滋病，还具有抗癌防癌、干扰素诱生剂及细胞免疫调节剂等功能。我们可利用高效液相色谱法测定甘草酸的含量。 案例分析二 分析条件 液相色谱仪: Agilent 1200 ; 配置：四元梯度泵，DAD检测器，柱温箱，自动进样器。 色谱柱： Agilent Zorbax SB C18，,150×4.6cm，5μm； 检测波长：276nm； 进样量：10μl； 柱温：28.2℃； 流动相：乙腈：0.5%冰醋酸溶液= 20 : 80 案例分析二 案例分析二 案例分析三 人参皂苷的高效液相色谱分析 分析条件 液相色谱仪: Agilent 1200 ; 配置：四元梯度泵，DAD检测器，柱温箱，自动进样器。 色谱柱： Agilent Zorbax SB C18，,150×4.6cm，5μm； 检测波长：203nm； 进样量：10μl； 柱温：30 ℃； 流动相：0-25min 19%-20%乙腈：0.1%磷酸溶液，25-60min 20%-40%乙腈，60-90min 40%-55%乙腈，90-100min 55%-60%乙腈。 案例分析三 案例分析三 案例分析四 当归有效成分的高效液相色谱分析 分析条件 液相色谱仪: Agilent 1200 ; 配置：四元梯度泵，紫外可变波长检测器。 色谱柱： Agilent Zorbax SB C18，250×4.6cm，5μm； 检测波长：284nm； 进样量：20μl； 柱温：28 ℃； 流动相：采用梯度洗脱。A:乙腈;B：水，0-15min A从5%升至70%，15-30min A保持70%. 案例分析四 案例分析四 案例分析五 红景天苷的高效液相色谱分析 分析条件 液相色谱仪: Agilent 1200 ; 配置：四元梯度泵，DAD检测器，柱温箱，自动进样器。 色谱柱： Agilent Zorbax SB C18,150×4.6cm，5μm； 检测波长：275nm； 进样量：10μl； 柱温：26.2℃； 流动相：甲醇：水=15:85 案例分析五 案例分析五 方法编辑、保存 液 相 色 谱 高效液相色谱法 液相色谱是色谱中的一类分离与分析技术，其特点是以液体作为流动相。对于大量有机化合物、离子型化合物以及易受热分解或失去活性的物质，不能直接或不适合用气相色谱方法进行分析，因此高效液相色谱的应用领域不断扩大和深入。特别是近几十年来，液相色谱固定相的高度发展，仪器不断更新，高效液相色谱目前已成为许多学科科学研究和日常分析的重要手段。 一、高效液相色谱法的特点 1、高效液相色谱可以分离分析高极性，高分子量和离子型的各种物质，只要被分析对象能够溶解于可作为流动相的溶剂中并能够被检测，就可以直接进行分析。某些目前尚不能被直接检测，或检测灵敏度不够的，也可以采用各种衍生技术，实现这些物质的检测。 2、高效液相色谱仪主要由高压输液泵、进样阀、柱子和检测器等组成。 3、柱子的柱效（以理论板数计）很高，每米可达3万块以上。一般只使用20～25cm长的柱子。由于填料的不断发展和改进，目前最短的柱子只有3cm长，板数可达3000～4000。已能够满足一般分析的需要，并具有很高的分析速度。 4、高效液相色谱仪通常在室温下操作，样品一般不须预处理，操作简便，很容易掌握。 5、高效液相色谱操作的难点在于流动相的选择。可