索取条款.PDFVIP

索取条款 本着科研工作者之间互通有无的原则，非营利性质的研究机构的科研人员可 向本实验室索取我们收集的人类全长cDNA，请在索要cDNA 前，详细阅读本索 取条款。 1. 索取人不得将cDNA 转让于第三方或用于商业用途。 2. 按照本实验室提供的方法，索取人可以使用PCR 方法方便快速地克隆相应 基因，但我们不能保证所提供的cDNA 一定能够满足索取人的实验要求，不 过我们欢迎索取人的反馈。 3. 本实验室收集的cDNA 数量众多，信息繁杂，不便查询，无法提供除cDNA 序列以外的任何信息，请勿询问。 4. 本实验室对提供cDNA 不收取任何费用，请索取人自付邮资（邮资到付）。 此外，因本实验室人力有限，索取的样品一般情况下不能多于10 个/次， 如有特殊需求，可以直接跟我们联系协调。本实验室每周寄出一至两次样 品，在寄出样品后，我们会邮件通知。本校实验室凭打印的邮件直接来本 实验室 （黄朝阳楼E309）领取。 5. 通过该网站仅能索取我们收集的cDNA，如需要我们发表的文章中所用到的 质粒，请另外来信索取。 6. 请严格按该方法通过PCR 来扩增cDNA，否则可能将无法得到需要的cDNA。 7. 对我们提供的cDNA 如有任何疑问，请与 cuihuhan@126.com 联系。 cDNA 获取方法 本实验室提供的cDNA 样品为 100 μL 含抗生素的菌液。收到菌液后，请先确认菌液是否浑浊，若菌液 澄清，请先在37 度摇床上过夜培养后再使用。另外，由于我们在建库时，每管中可能含有不只一种cDNA， 因此不推荐将菌液在平板上划线后挑取单克隆进行扩增。根据我们的测试，使用此方法获取目的 cDNA 的 概率达95% 以上。 具体方法如下： 1. 取1 μL 菌液为模板，PCR 扩增全长cDNA 。我们网站上的核酸序列为cDNA 的实际序列，因此设 计引物时，请严格按照我们提供的序列设计引物。 PCR 体系一定要有去污剂（如，Triton X-100），我们推荐的PCR 体系如下： 菌液模板 1 μL 10× PCR buffer 5 μL 10 mM dNTP mix 1 μL 10 μM Forward Primer 1 μL 10 μM Reverse Primer 1 μL Taq 2.5 U H O 至总体积50 μL 2 PCR 条件： 95℃ 5 min 95℃ 30 sec 58℃ 30 sec 30-35 循环 72℃ X sec （X 依产物长度和酶延伸速度而定） 72℃ 5 min 10× PCR buffer 配方： Tris-HCl (pH=8.8 at 25℃) 200 mM KCl 100 mM (NH ) SO 100 mM 4 2 4 MgSO4 20 mM Triton X-100 1% BSA 1 mg/mL 提示： 1) 实际上，很多（但不是全部）商业化的高保真酶同样可以用来扩增该cDNA，但是必须确保反应的体系中含有去污剂。 2) 若使用其它PCR 反应体系无法得到所需