05_培养基的选择.ppt

第三章 发酵工艺条件优化 第一节 培养基的选择和确定 一、培养基的营养成分 二、培养基的类型和用途 三、发酵培养基的选择 四、培养基的选择方法 五、培养基设计的步骤 二、培养基的类型和用途 用途： 筛选菌种 保藏菌种 检验杂菌 培养种子 发酵生产 （一）培养基的分类 （1）天然培养基 是采用化学成分还不清楚或化学成分还不恒定的各种植物和动物组织或微生物的浸出物、水解液等物质(例如牛肉膏、酵母膏、麦芽汁、蛋白胨等)制成的。 适合于各类异养微生物生长，而一般自养微生物都不能生长。 （2）合成培养基 是用化学成分和数量完全了解的物质配制而成的。成分精确，重复性强，可以减少不能控制的因素。 适用于在实验室范围作有关营养、代谢、分类鉴定、生物测定及选育菌种、遗传分析等定量研究工作。 但一般微生物在合成培养基上生长较慢，有些微生物营养要求复杂，在合成培养基上不能生长。 （3）半合成培养基 (复合培养基) 多数培养基配制是采用一部分天然有机物作碳源、氮源和生长因子的来源，再适当加入一些化学药品以补充无机盐成分，使其更能充分满足微生物对营养的需要。 大多数微生物都能在此培养基上生长繁殖。因此，在微生物工业生产上和试验研究中被广泛使用。 （4） 液体培养基 常用于大规模的工业生产及生理代谢等基本理论研究工作。 发酵工业多用作培养种子和发酵的培养基。 根据微生物对氧的要求情况，分别作静止或通风搅拌培养。 在菌种筛选工作和菌种培养工作中，也常用液体培养基进行摇瓶培养。 （5） 固体培养基 （二）发酵生产中的培养基类型 工业发酵中培养基往往是依据生产流程和作用分为： 斜面培养基 种子培养基 发酵培养基 摇瓶培养基 1．斜面培养基 作用： 这是供微生物细胞生长繁殖用的，包括细菌，酵母等的斜面培养基以及霉菌、放线菌生孢子培养基或麸曲培养基等。这类培养基主要作用是供给细胞生长繁殖所需的各类营养物质。 2．种子培养基(包括摇瓶种子和小罐种子培养基) 特点： 必须有较完全和丰富的营养物质，特别需要充足的氮源和生长因子。 种子培养基中各种营养物质的浓度不必太高。供孢子发芽生长用的种子培养基，可添加一些易被吸收利用的碳源和氮源。 种子培养基成分还应考虑与发酵培养基的主要成分相近。 3．发酵培养基 发酵培养基是发酵生产中最主要的培养基，是决定发酵生产成功与否的重要因素。 根据产物合成的特点来设计培养基： 对菌体生长与产物相偶联的发酵类型，充分满足细胞生长繁殖的培养基就能获得最大的产物。 对于生产氨基酸等含氮的化合物时，它的发酵培养基除供给充足的碳源物质外，还应该添加足够的铵盐或尿素等氮素化合物。 发酵培养基的各种营养物质的浓度应尽可能高些，这样在同等或相近的转化率条件下有利于提高单位容积发酵罐的利用率，增加经济效益。 发酵培养基需耗用大量原料，因此，原料来源、原材料的质量以及价格等必须予以重视。 三、发酵培养基的选择 1.必须提供合成微生物细胞和发酵产物的基本成分。 2.有利于减少培养基原料的单耗，即提高单位营养物质所合成产物数量或最大产率。 3.有利于提高培养基和产物的浓度，以提高单位容积发酵罐的生产能力。 4.有利于提高产物的合成速度，缩短发酵周期。 5.尽量减少副产物的形成，便于产物的分离纯化。 6.原料价格低廉，质量稳定，取材容易。 7.所用原料尽可能减少对发酵过程中通气搅拌的影响，以利于提高氧的利用率，降低能耗。 8.有利于产品的分离纯化，并尽可能减少产生“三废”的物质。 发酵培养基的设计和注意事项 1. 提供必要的营养成分： 培养基成分必须满足细胞生长，代谢活动和合成产物所需的基本要求。 2. 配制合适的浓度： 可以从发酵动力学有关生长、产物合成和基质利用物料平衡的关系中大致推算所需原料或大致计算出所需主要原料的需要量。 3. 主成分与其他成分的配比。 4. 控制合适的pH。 5.避免产生微生物不能利用的物质或形成沉淀。 葡萄糖与铵盐或氨基酸的氨基在灭菌高温下作用形成深褐色物质。这种物质不被微生物利用。因此这两类营养物不宜直接配在一起进行灭菌，而应采用分开灭菌后再加入发酵罐内。 硫酸铵中的SO42-与钙盐易形成难溶的硫酸钙，因此二者也不宜直接配成培养基。 6.注意代谢调节物的影响。 有些物质存在于培养基中往往能明显地促进或抑制发酵产物的形成。如：前体物质、诱导剂、阻遏物或抑制剂、金属离子…… (1) 添加有关前体物质 (2) 添加诱导物 目前工业用微生物酶多数为诱导酶，如蛋