小尾寒羊抑制素beta亚基基因rflp及sscp多态性的研究.pdfVIP

小尾寒羊抑制素beta亚基基因 RFLP及SSCP多态性的研究 摘要 本研究分析了四个绵羊品种的抑制素beta．A亚基基因RFLP多态性及 抑制素beta-B亚基基因SSCP多态性。抑制素beta—A亚基以两对引物进行 外显子II特定片段(本研究中记为INHBAI)，未发现多态性。第二对引物 因为目前尚94e肯,J素beta-A亚基基因全序列的报道，所以通过比较绵羊抑 制素betaoA亚基mRNA全序列与牛抑制素beta-A亚基基因全序列设计引 物，所得扩增片段包括外显子II全序列以及内合子序列。通过限制性酶A细 I的RFLP分析鉴别出两种基因型，在1．删徽胶E的酶切带型分别为 计算了这两种基因型在四个绵羊品种内的基因频率、基因型频率，A 基因为优势等位基因；Hardy．Weinberg检验证明基因频率及基因型频率处 于平衡状态。对1NHBA JI的群体遗传特性分析显示该基因在四个绵羊群体 中都呈低度多态。方差分析结果表明，INHBAII基因型对小尾寒羊第一胎 产羔数和第二胎产羔数均有显著影响(P0．05)。最小二乘均值的差异显著 性分析表明，对一胎产羔数，AB型小尾寒羊比AA型平均多产0．45只 (P0．05)；对二胎产羔数，AB型小尾寒羊产羔数比AA型平均多产O．53 只(P0．05)。 外显子II直接编码成熟抑制素beta-A亚基，对402bp的片段测序并与 已有的九个国外绵羊品种同一位点DNA序列比较。结果发现小尾寒羊与已 知的家养绵羊的序列图完全重合。除野生绵羊品种外，家养绵羊之间DNA 序列只有两个碱基突变，分别是Rhoenschaf绵羊25bp处G—A，引起氨基 的beta-B亚基基因外显子II特定片段，未发现多态性。 由以上实验结果，我们认为抑制素be协A亚基基因可以作为小尾寒羊 产羔数性状的分子遗传标记，用于标记辅助选择。 刖 蟊 加入世界贸易组织以后，国内外羊肉市场呈现需求趋旺的发展势头。 据有关部门研究，我国农村羊肉消费的弹性系数为0．57，城市为0．49，即是 说居民收入每增加10％，羊肉的消费量将分别增长5．7％和4．9％。因而，羊 肉是最有发展潜力的畜产品之一，羊毛、裘皮是重要的轻纺工业原料。我 国现有绵羊1亿多只，居世界前列，但出栏率仅有19．6％，低于世界平均水 平(35％)，而畜牧业发达国家都超过50％。要改变我国养羊业周转慢、效率 低、效益差的局面，有力的手段之一就是提高繁殖力。寻找小尾寒羊高繁 殖力的分子遗传标记，对于我国肉类增产和育成多胎肉用“超级绵羊”具 有重要的现实意义。 绵羊的产羔数是一个遗传力很低的数量性状，其遗传力只有O．1左右， 因此，难以用常规的育种技术来改良产羔数性状。标记辅助选择(marker assisted selection，MAS)能够通过影响选择的时间、选择的强度以及准确性 而极大地提高这种低遗传力性状的选择功效，而找到与这些数量性状位点 相连锁的分子遗传标记，则是实现标记辅助选择的先决条件【。 基于上述考虑，本研究以绵羊抑制素beta亚基基因的多态性为研究内 容，以有产羔记录的山东小尾寒羊为研究对象，同时把繁殖力各不相同的 多赛特羊、萨福克羊、湖羊作为对照，利用PCR．RFLP方法及PCR．sscP 方法检测绵羊beta亚基基因突变的情况，并初步探索beta亚基基因不同基 因型与小尾寒羊产羔数的关系，以期找到与绵羊产羔数相关的分子遗传标 记，为绵羊产羔数的标记辅助选择提供科学依据。 1小尾寒羊的研究 小尾寒羊是在冀、鲁、豫、皖、苏交界地区，黄淮冲积平原富饶农区 的特定自然生态环境条件下(平均海拔50米，无霜期216天)，经过长期 自然选择和群众自发培育形成的一个古老的农区肉、裘兼用品种。在长期 的人工选择过程中，山东小尾寒羊具有四个典型特征：一是公羊头大颈粗， 带有螺旋形大角，母羊头小颈长，有小姜角或无角：二是体躯长、四肢高， 被毛白色；三是尾短且肥尾尖上翻：四是常年能发情配种，四季均可产羔。 该品种具有多种稳定遗传性状的优秀基因，数量性状和质量性状突出。主 要优点是：体格大、早期生长发育快、成熟早、繁殖率商、适应性强和肉 裘品质好。其高繁殖力闻名于世，是全球重要的遗传资源。也有一些缺点比 如产肉性能低、不善于爬山游走、不适应高寒丘陵山区大群放牧饲养。