大鼠btce蛋白对体外培养胰岛保护作用及对糖尿病大鼠降糖作用的研究.pdfVIP

上海交通大学医学院2003级博士论文 极少数具有增殖能力的细胞可复制、分裂(proliferation)【”。2．来源于胰腺内的。干细胞” 细胞”可转化为胰岛8细胞12…。 对于胰岛细胞的再生能力目前还没有一个详细、权威的描述12l】。胰岛细胞既不象表皮 细胞那样具有旺盛的增生能力，也不同于神经元、骨骼肌细胞那样处于永久的静止状态。由 于胰岛细胞的再生能力在糖尿病发生、发展中处于关键地位，阐明胰岛细胞的再生机制，激 发、提升胰岛细胞的再生能力一直是人们探索的焦点。从20世纪80年代，人们就开始寻找 “胰岛再生相关基因／因子”。这类因子被认为可能在胰岛发生、发育，增殖，分泌调控等事 件上扮演重要角色，可有效地促进胰腺膑岛的增殖，加速损伤的修复啕。陆续发现的如 mRNA (EGF)家族，1993年首先由Shing从小鼠胰腺B细胞瘤细胞中克隆成功嘲。BTC 高表达于正常及肿瘤胰腺中。目前研究提示：1．BTC可促进某些细胞转化为胰岛素分泌细 胞㈨．2．促进胰岛细胞的复制．增殖【31l。3．BTC注入糖尿病动物模型体内可能通过促胰岛 再生起到缓解高血糖的作用p”。4．BTC基因的某些SNP可能与2型糖尿病的发生相关p”。 可见，BTC可能是一个与胰岛，糖尿病密切相关的因子． BTC促胰岛再生的作用基本得到肯定，但其作用机制不清。诸如：BTC促胰岛增殖和 促胰岛干细胞分化的作用对促进胰岛再生疏轻疏重?BTC是通过erbB，1、efbB-．4受体还是 其特异受体发挥作用?BTC在糖尿病发生、发展过程中扮演什么样的角色?BTC对胰岛的 直接作用如何?这些最基础的问题目前仍未获得明确的答案。 研究BTC的意义在于：1．目前的资料均提示BTC是～个促胰岛再生因子，挖掘其在 胰岛移植中的保护价值及对千细胞的诱导潜能，对于这两个领域的研究都具有推动作用。2． BTC在胰腺内特异的高表达，很可能在胰腺，胰岛的发生、发育、增殖、分泌等重要事件中 起关键作用阻1D”，搞清BTC在这些环节所发挥的作用及其机制，对于揭示胰岛的损伤、糖 尿病的发生可能会提供极有价值的线索，也是糖尿病病因学研究的一个良好的切入点。3． BTC具有促胰岛再生作用，具有成为糖尿病治疗药物的潜质，这方面的研究也是一个值得 深入的领域。 EGF．1ike 本实验所研究的BTCe(thedomain ofbetaeellulin)是BTC的重要功能片段。 较全长BTC少30个氨基酸，可与郴一I、erbB-4受体结合，其促细胞增殖的能力与全长无 差异p61，但BTCe对于胰岛，胰腺的作用目前尚无报道。本实验通过原核表达的方法获得大 上海交通大学医学院2003级博士论文 量有生物活性的BTCe蛋白，探讨对体外培养大鼠胰岛的影响作用，发现：1，BTC／BTCe对 胰岛无急性促分泌作用。2．在胰岛的长期培养过程中，BTC／BTCe可有效地延缓GSIS下降 的幅度，对于胰岛的分泌功能具有保护作用。但BTC／BTCe并未引起胰岛内关键基因insulin、 机制。为探讨BTCe对糖尿病动物高血糖的影响作用，采用裸质粒的肌肉注射实现糖尿病大 鼠的体内转染。质粒转染15—20天后，糖尿病大鼠的血糖出现明显下降，糖耐量显著改善。 免疫荧光显示：胰腺内出现了大量PDX—l阳性的导管细胞和胰岛素染色阳性细胞。这些结 果提示：BTCe可能是通过促进胰腺内导管细胞的增生和对某些前体细胞的诱导发挥对糖尿 病大鼠高血糖的缓解作用，也可能存在对信号转导通路的修复等更深层次的机制。 AR42J细胞分化为胰岛素分泌细胞的功能【3刁．本实验选择BTCe作为BTC研究的切入点， 首先明确BTCe对胰岛、糖尿病大鼠的影响作用，近而通过BTC、BTCe的比较研究，找出 两者作用的异同，作为探讨BTC促胰岛再生机制的线索。另外，最近文献报道，体内高表 达BTC的转基因小鼠，出现了多脏器的损伤【“，对BTC未来应用的安全性问题提出了警示。 BTCe能否加强其针对胰岛修复的特异性，减少对全身的影响，也是BTCe进一步研究的方 向。 关键词：B咖ellulin，胰岛。再生，糖尿病