影响菠萝蛋白酶活力主要因素的研究.pdfVIP

定性的影响相当明显。菠萝蛋白酶热失活动力学研究结果表明，在30C下的热失 (30—45℃)为36．9 kJ／mol，频率因子A。=8．39x105／h：△E。(45—60℃)为22．5 kJ／mol，A。=4．23x103／h。菠萝蛋白酶加入B-l稳定剂后，酶失活速率常数变小， 半衰期延长，活化能增加，从而使酶的稳定性提高。 关键词：菠萝蛋白酶酶活力稳定性酶活力DSC 前 言 comosus)果实、茎等提取的一种生化制品， 菠萝蛋白酶是从菠萝(Anana 八成熟的菠萝果汁含有约0．4％的菠萝蛋白酶，成熟的菠萝果汁含有o．3Vo蒯j 菠萝蛋白酶，茎汁含8．7％的菠萝蛋白酶峨菠萝蛋白酶在食品、医药、轻工化妆 品等方面有广泛的应用【埘】，在食品工业中可以用于蛋白质水解，提高从动物和 植物提取油等成分的得率，控制和改良蛋白质的功能性质，改进鱼蛋白质加工性 能，提高麦芽中淀粉酶的活力，特别是在水解蛋自制备营养口服液上有着良好的 应用前景口。31。医学上认为菠萝蛋白酶是一种具有消炎及抗水肿作用的巯基酶，l晦 床上可用作抗水肿和消炎药，口服后能加强体内纤维蛋白的水解作用，将阻塞于 组织的纤维蛋白及血凝块溶解，改善体液的局部循环，从而消除炎症和水肿。菠 萝蛋白酶与抗生素及化疗药物并用，能促进药物对病灶的渗透和扩散，它的优点 是能分解纤维蛋白的大分子，但不破坏凝血所必需的纤维蛋白原，可用于治疗各 种炎症、水肿、血肿及血栓，如支气管哮喘、支气管炎、急性肺炎、产后乳房充 血、乳腺炎及视网膜炎等，与抗菌药物并用对治疗关节炎、关节周围炎及小腿溃 疡等均有效。以菠萝果实中提取的粗酶为原料经过浸提、离心(或过滤)、离子 交换、盐析、透析、干燥等工艺制备的精制菠萝蛋白酶混合物，主要含有分子量 为27，ooO·30，000的两个肽酶，用其制备的脱痂制剂治疗深二度和三度烧伤可 在3_4小时完成脱痂，全过程无需麻醉、备血，费用低，无手术痛苦。脱痂十分 彻底，对于功能部位的烧伤治疗具有重要的意义柳。也有研究表明，菠萝蛋白酶 能作为胆汁酸受体拈抗剂阻止胃肠道重吸收胆汁酸，从而治疗及预防高胆固醇血 症及类似疾病【51。近年来也有研究发现菠萝蛋白酶是免疫刺激剂、抗微生物剂和 抗癌剂，它可用于治疗免疫系统受抑制的病症、作为疫苗佐剂可用于治疗实体瘤 或其它肿瘤【61。厦门大学的抗癌研究中心利用菠萝蛋白酶诱导癌细胞分化，从而 达到治疗癌症的效果f9l。 Bergmann和Martin相继指出，菠萝蛋白酶存在于果、皮和茎部中，存在于茎部 bromelain 的称为茎酶(Stem E．C．3．4．22．4)，存在于果质中的酶称为果酶(Fruit bromelain E．C．3．4．22．5)。Murachi和Neurathl23I、E1．Gharbawi和Whitakerl24】采取 层析法分离提取了菠萝蛋白酶并研究了它的活性成分。Mumchi等∞】p5l采用电泳 和超滤方法提取和纯化菠萝蛋白酶，通过凝胶过滤和离子交换柱层析获得纯菠萝 蛋白酶产品。结构特性研究结果表明，果菠萝蛋白酶是酸性酶，等电点为pH4．6， 茎菠萝蛋白酶的分子量比果实菠萝蛋白酶的大，约为33，000，等电点为pH9．5， 其活性中心的氨基酸顺序和催化机理与木瓜蛋白酶相似，并确定茎菠萝蛋白酶为 糖蛋白。Ota S等刚的研究支持了该结果，并指出，茎菠萝酶分子量为36．000， 未端氨基酸残基是丙氨酸，果酶分子量为30，000，未端氨基酸残基也为丙氨酸， 诺特等幢7’由十二烷基硫酸钠．聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS．PAGE)测定果菠萝蛋 白酶分子量为22，200—25，080，等电点3．8-4．8，并确定了菠萝蛋白酶氨基酸末端序 列。 表1 0t：as测定菠萝蛋白酶的氨基酸组成 茎菠萝 果菠萝蛋白酶 氨基酸 蛋白酶 生青果 熟果 天冬氨酸 29．4 29．8 29．8 谷氨酸