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(1)16×25型的计数板 将计数室放大,可见它含16中格,每个中格有25个小格,抽样检测一般取四角:1、4、13、16四个中方格(100个小方格)计数 。 (2)25×16型的计数板 中央大方格含25个中方格,每个中方格又分成16个小方格,供细胞计数用(见图三)。一般计数四个角和中央的五个中方格(80个小方格)的细胞数。 例2:检测员将1 mL水样稀释10倍后,用抽样检测的方法检测 每毫升蓝藻的数量;将盖玻片放在计数室上,用吸管吸取少许 培养液使其自行渗入计数室,并用滤纸吸去多余液体。已知每 个计数室由25×16=400个小格组成,容纳液体的总体 积为0.1 mm3。现观察到图中该计数室所示a、b、c、d、e 5个中 格80个小格内共有蓝藻n个,则上述水样中约有蓝藻 个/mL 探究:培养液中酵母菌种群数量的变化 目的要求 1、学习利用血球计数板进行微生物计数的方法 2、实验探究培养液中酵母菌种群数量的变化 3、注意样方法的应用 4、体会影响种群数量变化的因素 一、实验原理 1.在含糖的液体培养基(培养液)中酵母菌繁殖很快,迅速形成一个封闭容器内的酵母菌种群,通过细胞计数可以测定封闭容器内的酵母菌种群随时间而发生的数量变化。 2.用液体培养基培养酵母菌,种群的增长受_________________、________、________、__________等因素的影响。 3.在理想的无限环境中,酵母菌种群呈“J”型增长;自然界中_____________总是有限的,酵母菌种群呈“S”型增长。 4.计算酵母菌数量可用抽样检测的方法——____________法。 探究“培养液中酵母菌种群数量的变化” 培养液的成分 空间 pH 温度 资源和空间 显微计数 基础知识点梳理 怎样随时间 S J 等量 相同 等量 平均值 增长 二、实验研究方法思路 三、实验流程 1.酵母菌培养 2.抽样检测 ①将500mL 注入锥形瓶 ②将0.1g 投入锥形瓶的培养液中混合均匀,并置于适宜的条件下培养 质量分数为5%的葡萄糖溶液注入锥形瓶中 活性干酵母 ①振荡酵母菌培养液,使 ; ②每天定时采用 方法抽取1mL酵母菌培养液 酵母菌均匀分布 抽样检测 3.观察计数 ①将含有酵母菌的培养液滴在计数板上的 ____ ,让培养液自行渗入计数,用滤纸吸去多余的培养液 ②待酵母菌细胞全部 ,在显微镜下计数 内酵母菌的数量 ③估算1mL培养液中酵母菌总数 盖玻片边缘 沉降到计数室底部 一个方格内 4.重复(2)、(3)步骤: 5.构建模型分析: 将所得数据用曲线表示出来,得出酵母菌种群数量变化规律 连续观察7天,统计数目 四、酵母菌计数方法——显微计数法 先将盖玻片放在计数室上,用吸管吸取培养液,滴在盖玻片边 缘,让培养液渗入,吸去多余滤液。片刻后,待酵母菌全部沉 降到计数室底部,将计数板放在载物台中央,计数一个方格内 酵母菌数量,以此为据,估算酵母菌总数。 五、表达和交流 1.根据实验数据可得如图所示曲线。 增长曲线的总趋势是先 再 。原因是在开始时 培养液的营养物质充足、空间充裕、条件适宜,因此酵母 菌大量繁殖,种群数量剧增;随着酵母菌数量的不断增多 ,营养物质消耗,pH变化等,生存条件恶化,酵母菌死亡 率高于出生率,种群数量下降。 2.影响酵母菌种群数量的因素可能有 、温度、 及_____________等。 增加 降低 养分 pH 有害代谢废物 归纳小结 1.本探究实验应注意如下内容: (1)每天定时取样计数,用血球计数板计数酵母菌个数,并作记录,连续观察7天,结果记录最好用记录表,如下: (2)显微镜计数时,对于压在小方格界线上的酵母菌,应遵 循“计上不计下,计左不计右”的原则计数。 (3)从试管中吸出培养液进行计数前,需将试管轻轻振荡几 次,目的是使培养液中的酵母菌均匀分布,减小误差。 (4)每天计数酵母菌数量的时间要固定。 (5)活酵母有出芽生殖现象,若芽体达到母细胞大小的一半时,即可作为两个菌体计数,若芽体小于母细胞一半时为1个酵母细胞。 …… 数量/个 …… 6 5 4 3 2 1 时间/天 (6)溶液要进行定量稀释:如果一个小方格内酵母菌过多,难以数清,应当对培养液进行稀释以便于酵母菌的计数。 具体方法是:摇匀试管,取1mL酵母菌培养液,加入成倍的 无菌水稀释,稀释n倍后,再用血球计数板计数,所得数值乘以
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