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Lambda 35 UV 培训提纲
Lambda 35 UV 培训提纲
一 原理
紫外-可见光谱
分子的价电子在吸收辐射并跃迁到高能级后所产生的吸收光谱。通常被称为电子光谱,由于其波长范围是在光谱的可见和紫外区,所以电子光谱又叫做紫外-可见光谱。涉及到的跃迁有:n→σ*(200nm), n→π*,π→π*(200nm)。
范围
真空紫外:10nm-200nm
研究对象多在该区域
仪器可测光谱范围:190-1100nm
朗伯-比尔定律
A=lg=lg=εbc
A:吸光度;T:透光率(%表示);ε:摩尔吸收系数,ε大说明溶液对单色光的吸收能力强。
该定律表示入射光通过溶液时,透射光与该溶液的浓度和厚度的关系。
根据朗伯-比尔定律,吸光度与溶液浓度应是通过原点的线性关系(b一定),但在实际工作中吸光度与浓度之间常常偏离线性关系,产生偏离的主要因素有:
样品溶液因素:朗伯-比尔定律通常只有在稀溶液时才成立,随着溶液浓度增大,吸光质点间距离缩小,彼此之间相互影响和相互作用加强,破坏了吸光度与浓度之间的线性关系;
仪器因素:朗伯-比尔定律只适用于单色光,但经仪器狭缝投射到被测溶液的光,并不能保证理论要求的单色光,这也是造成偏离朗伯-比尔定律的一个重要因素。
一些概念
生色团:指的是分子中能够吸收电磁辐射(紫外及可见)并引起电子跃迁的不饱和基团。即含有π键的基团,含有n→π*或π→π*跃迁。如:-=-,-=O,-N=N-,-N=O等。
助色团:它们本身不会像生色团那样吸收辐射而产生吸收谱带,但是它们的引入却会增大生色团吸收谱带的强度并使其向长波长位移,这一类基团就称为助色团。助色团通常是一些含有孤对电子的基团。如-OH,-NH2,-Br,-SH等。
溶剂的极性不同,将使吸收光谱的位置发生移动。极性较大的溶剂,一般会使π→π*跃迁谱带向长波长方向移动,称为红移;使n→π*跃迁谱带向短波长移动,称为蓝移。
二 仪器概况
型号:Lambda 35
生产厂商:美国珀金-埃尔默(Perkin Elmer)责任有限公司
性能指标:光谱范围 190~1100nm
带 宽 0.5,1,2,4nm
波长精度 ±0.1nm
扫描速度 7.5,15,20,60,120,240,480,960,1920nm/min
控温范围 室温一下10℃~100℃
温度精度 ±0.1℃
应用:含有生色团和共轭体系的有机化合物的鉴定。能用于元素周期表中几乎所有金属元素的测定,亦能用于非金属元素的分析。
可用于不同形态的样品测试。具有多种测试方法——光谱扫描、时间驱动、多波长测定和定量分析。通过引入附件装置,可进行薄膜样品的透射分析。液体(乳液)与固体粉末样品的反射或透射分析。
附件:液体样品架、石英比色皿(10mm光程)
固体样品架
升温附件及测温附件
光路:
光源
滤光轮——确保只有所需的反射光到达检测器
单色器
分光镜Beam splitter——将光分为两束,样品和参比
检测器——两个,光电二极管,将光信号转化为电信号
三 实验演示
1.样品要求
固体样品架:要求样品在载玻片上成膜,透明,整个玻片要求厚度5mm以下,面积大于15mm×15mm,小于45mm×45mm
液体样品架:要求溶液浓度为10-4~10-7g/ml
2.开、关机
开机 开光谱仪电源,预热稳定10min
打开计算机,打开Lambda 35 WinLab程序
关机 将方法和数据存盘
关闭方法窗
退出WinLab软件,退出Windows
取出样品及参比
关闭光谱仪电源
清洁光谱仪,特别是样品室
整理实验所用物品,清洁试验台面
3.WinLab使用
(一)不需预定方法作简单测定时操作如下:
①选择菜单Application→manul→Inst只需在一个固定波长校零;At current wavelength 选择一段波长校本底,键入起止波长值及扫描速度
②打开样品室盖(注意:尽量缩短样品室启开时间,以防灰尘烟雾污染)
③放入含参比的比色皿或空比色皿
④快速关上样品室盖,
工具条→Autozero中完成自动校零
⑤取出参比皿,换上样品→start
(二)方法设定
①确定路径
菜单utilities→configuration→确定打开方法路径和数据路径
②建立方法、方法编辑
选择菜单Application→Scan,Time Drive,Wave prog,Conc可选择四种方法其中一种
Scan扫描—用以进行光谱扫描
TD时间驱动—用以观察一定时间内纵坐标值的变化
WP波
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