11--12细胞周期-36.pptVIP

蒲淑萍 基础医学院 细胞生物学及遗传学教研室 2012年5月 ★细胞的最终命运： 细胞分裂(cell division)及生长（相关物质准备）→细胞增殖(cell proliferation)，受到严密的调控机制所监控 细胞死亡(cell death) ●细胞周期 ●细胞周期时间(Tc) G1(DNA合成前期) 变异范围大(0h~数年) 间期 S (DNA合成期) 8~30h G2 (DNA合成后期) 1~5h 分裂期(M) 0.5~1h ●细胞的增殖特性（机体细胞的状态） ●细胞周期研究方法（p183） 细胞周期模型 细胞周期同步化 3H-TdR（氚标记胸苷）有丝分裂标记法 流式细胞技术 第二节 细胞周期的主要事件 一、G1期：细胞生长、分裂决定、复制准备 二、S期： DNA合成、染色质组装、中心体复制 1. DNA复制，2n → 4n 2. 组蛋白、非组蛋白合成 3. 染色质复制（组装成核小体） 4. 中心体复制 三、G2期：复制检查、分裂准备 1. 越过G2期检验点 2. RNA、蛋白质（如微管蛋白、染色质凝集相关蛋白、M期调控蛋白）合成（→细胞的第二生长期） 3. DNA含量4n 四、M期：染色体分离、胞质分裂 DNA的精确分配 第三节 细胞周期的运行机制 一、周期性基因表达是细胞周期的原动力 如细胞分裂周期基因（cell division cycle gene，cdc基因） 二、细胞周期引擎是cyclin-Cdk蛋白质磷酸化调控系统 其中，G1期为cyclin D-Cdk4/6和cyclin E-Cdk2 S期和G2为cyclin A-Cdk2 M期为cyclin A/B-Cdk1 cyclin-Cdk复合物：催化靶蛋白(如 H1、H3、NHP、lamin、细胞骨架蛋白等)的磷酸化，参与周期的调控。 周期蛋白(cyclin)： 细胞周期中周期性合成和降解的蛋白质，与Cdk结合，促Cdk对靶蛋白的磷酸化，是复合物的调节亚基。目前从酵母和各类动物中分离出的周期蛋白有30余种，在脊椎动物中为A1-2、B1-3 、C、 D1-3、E1-2、F、G、H等。 依赖周期蛋白的蛋白激酶(cyclin dependent kinase，Cdk)：催化靶蛋白的磷酸化，为复合物的催化亚基。 CDK在动物中有7种。 HeLa细胞中cyclin的周期性表达 M期cyclin A/B-Cdk1 (成熟促进因子，MPF) E1：泛素激活酶 E2：泛素结合酶 E3：泛素连接酶，包括APC和SCF。 APC(后期启动复合物)的活性变化是分裂中期/后期转化的关键问题。 SCF(蛋白降解复合体)自身则由APC蛋白来调控。 ◆生长因子对细胞增殖的影响 ●目前发现的生长因子多达几十种： 多数有促进细胞增殖的功能，如表皮生长因子（EGF）、神经生长因子（NGF）； 少数具有抑制作用，如肿瘤坏死因子（TNF）； 个别如转化生长因子β(TGF-β)具有双重调节作用，能促进一类细胞的增殖，而抑制另一类细胞。 五、细胞周期运转的阻遏(负调控) 细胞至少可通过两种不同机制阻遏细胞周期的运转： ◆Cdk抑制蛋白(CKI)通过与CDK结合来抑制Cyclin-Cdk复合物的装配或其活性，而将细胞阻止在不同的检验点。 根据CKI的分子质量，分别被命名为p15、p16、p21、p27、p53等。这些蛋白质具有一定的同源性。 （p179） ◆周期调控系统组分停止合成，如G0细胞，大部分Cyclin和Cdk都消失，这在多细胞生物尤其明显。 p53基因：位于人类染色体17p13，表达的p53蛋白是一种核结合蛋白，能阻止DNA损伤或突变的细胞通过R点，从而将细胞阻于G1期，抑制细胞增殖。 作用方式之一为p53依赖途径之p53/p21 机制。 （p182、180） 第四节 细胞周期与疾病 甲状旁腺良性瘤、乙型肝炎病毒诱发的肝癌、乳腺癌、淋巴细胞瘤和cyclinA或D等的过度表达有关。 cyclinA与HBV基因的一段有同源性，故HBV 可整合入cyclinA 基因的