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第十章核苷酸代谢、dna复制
教 案
2004 ~ 2005 学年 第一 学期
学 院 名 称 生命科学学院
教 研 室
课 程 名 称 生物化学
授 课 对 象 2001级生物技术生物工程专业
授 课 教 师 陈文利
职 称 副教授
教 材 名 称 现代生物化学
2004年11月 日
授课题目(教学章、节或主题):
第十章 核苷酸代谢 教学器材与工具 ?多媒体设施、黑板与笔 授课时间 第2周一第5-8 节 教学目的、要求(例如识记、理解、简单应用、综合应用等层次):
掌握核苷酸的碳氮来源,主要以学生自学为主,只用一节课完成教学内容。 教学内容(包括基本内容、重点、难点):
比较嘌呤核苷酸和嘧啶核苷酸合成的区别
重点:重点介绍合成的开始阶段,以及过程中哪些物质在什么时候进入。
难点:氨基酸和一碳单位与嘌呤核苷酸和嘧啶核苷酸的关系 教学过程设计(要求阐明对教学基本内容的展开及教学方法与手段的应用、讨论、作业布置) 授课题目(教学章、节或主题):
第十一章 DNA复制、 教学器材与工具 ?多媒体设施、黑板与笔 授课时间 第2周一第5-8 节 教学目的、要求(例如识记、理解、简单应用、综合应用等层次):
核酸的组成成分及性质特点,用动画描述核酸的二级结构及主要的性质,要求学生掌握核酸的二级结构特征及其稳定作用力。
教学内容(包括基本内容、重点、难点):
第一节?????? DNA的代谢
一、DNA代谢包括DNA复制、修复和重组
第二节 DNA复制的一般规律
二、DNA复制是半保留的
三、 DNA的复制的起始点和方向 P293
四、 DNA的复制是半不连续的
第三节 DNA聚合酶
一、 DNA是由DNA聚合酶催化合成的
二、 DNA聚合酶催化DNA合成的精确性
三、大肠杆菌的三种DNA聚合酶
四、DNA复制需要许多酶和蛋白质因子
P297
第四节 细胞DNA复制的阶段性
一、原核细胞DNA的复制过程
① 解 链
解开双螺旋-----解链酶(helicase)
改变超螺旋-----DNA旋转酶(gyrase) 或拓扑异构酶Ⅱ(topoisomeraseⅡ)
防止单链结合-----SSB蛋白
(single-strand bindingprotein)
②引发
复制是在一段RNA的基础上加进脱氧核苷酸的。
引物酶(primase):
催化引物合成的是一 种RNA聚合酶 。
起始复合物的关键成分是dnaA蛋白。这种蛋白质是大肠肝菌dnaA基因的产物,称为dnaA蛋白。
引 发 体 (Primosome) P301
“引发体”这一术语,一般用来描述在DNA的引发阶段所形成的包括引发酶和解旋酶在内的蛋白复合物。引发体能沿着结合了SSB蛋白的DNA单链定向运动,并在不同位点合成RNA引物。
起始阶段
起始是DNA复制中较复杂的一环,所需的各种酶和蛋白质因子较多,细节也未尽清楚。
DNA链的合成与延伸
③前导链leading strand的连续合成
④滞后链的不连续合成(lagging strand)
DNA的两条链的方向相反,在3‘—5‘模板链,前导链是连续合成,如新生DNA的一条链从5‘—— 3‘端合成,则另一条链必须从3‘——5‘端延伸。
但迄今发现的DNA聚合酶都只能催化DNA链从
5’端向3’端延长。
催化酶:DNA聚合酶
原核DNA聚合酶有Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ
方向:沿着模板链3‘-5‘方向来催化DNA新链的合
成形成的共价键。
延长阶段
滞后链是一段一段合成的,所以5‘-3‘的聚合导致3‘-5‘方向的总的生长。
冈崎片段
复 制 的 终 止
⑤切除引物,修补空缺
(DNA聚合酶Ⅰ,以它的5‘-3‘核酸外切酶活性去切)
修补空缺(DNA聚合酶Ⅰ ,以它的5‘-3‘DNA聚合酶活性)
复 制 的 终 止
⑥连接切口(DNA连接酶)
四、真核细胞DNA的复制
P303
第五节 DNA修复
DNA修复系统的基本类型
错配修复
碱基切割修复
核苷酸切割修复
直接修复
重组修复与差错倾向修复
六. DNA的损伤与修复
修复的三个系统:
DNA损伤修复系统大致分为三类:
光复活的修复
切除修复
重组修复
其中切除修复最为普遍。
基因重组与DNA”克隆”
DNA重组技术
质粒
核酸探针
聚合酶链式反应(PCR)技术
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