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第十章核苷酸代谢、dna复制

教 案 2004 ~ 2005 学年 第一 学期 学 院 名 称 生命科学学院 教 研 室 课 程 名 称 生物化学 授 课 对 象 2001级生物技术生物工程专业 授 课 教 师 陈文利 职 称 副教授 教 材 名 称 现代生物化学 2004年11月 日 授课题目(教学章、节或主题): 第十章 核苷酸代谢 教学器材与工具 ?多媒体设施、黑板与笔 授课时间 第2周一第5-8 节 教学目的、要求(例如识记、理解、简单应用、综合应用等层次): 掌握核苷酸的碳氮来源,主要以学生自学为主,只用一节课完成教学内容。 教学内容(包括基本内容、重点、难点): 比较嘌呤核苷酸和嘧啶核苷酸合成的区别 重点:重点介绍合成的开始阶段,以及过程中哪些物质在什么时候进入。 难点:氨基酸和一碳单位与嘌呤核苷酸和嘧啶核苷酸的关系 教学过程设计(要求阐明对教学基本内容的展开及教学方法与手段的应用、讨论、作业布置) 授课题目(教学章、节或主题): 第十一章 DNA复制、 教学器材与工具 ?多媒体设施、黑板与笔 授课时间 第2周一第5-8 节 教学目的、要求(例如识记、理解、简单应用、综合应用等层次): 核酸的组成成分及性质特点,用动画描述核酸的二级结构及主要的性质,要求学生掌握核酸的二级结构特征及其稳定作用力。 教学内容(包括基本内容、重点、难点): 第一节?????? DNA的代谢 一、DNA代谢包括DNA复制、修复和重组 第二节 DNA复制的一般规律 二、DNA复制是半保留的 三、 DNA的复制的起始点和方向 P293 四、 DNA的复制是半不连续的 第三节 DNA聚合酶 一、 DNA是由DNA聚合酶催化合成的 二、 DNA聚合酶催化DNA合成的精确性 三、大肠杆菌的三种DNA聚合酶 四、DNA复制需要许多酶和蛋白质因子 P297 第四节 细胞DNA复制的阶段性 一、原核细胞DNA的复制过程 ① 解 链 解开双螺旋-----解链酶(helicase) 改变超螺旋-----DNA旋转酶(gyrase) 或拓扑异构酶Ⅱ(topoisomeraseⅡ) 防止单链结合-----SSB蛋白 (single-strand bindingprotein) ②引发 复制是在一段RNA的基础上加进脱氧核苷酸的。 引物酶(primase): 催化引物合成的是一 种RNA聚合酶 。 起始复合物的关键成分是dnaA蛋白。这种蛋白质是大肠肝菌dnaA基因的产物,称为dnaA蛋白。 引 发 体 (Primosome) P301 “引发体”这一术语,一般用来描述在DNA的引发阶段所形成的包括引发酶和解旋酶在内的蛋白复合物。引发体能沿着结合了SSB蛋白的DNA单链定向运动,并在不同位点合成RNA引物。 起始阶段 起始是DNA复制中较复杂的一环,所需的各种酶和蛋白质因子较多,细节也未尽清楚。 DNA链的合成与延伸 ③前导链leading strand的连续合成 ④滞后链的不连续合成(lagging strand) DNA的两条链的方向相反,在3‘—5‘模板链,前导链是连续合成,如新生DNA的一条链从5‘—— 3‘端合成,则另一条链必须从3‘——5‘端延伸。 但迄今发现的DNA聚合酶都只能催化DNA链从 5’端向3’端延长。 催化酶:DNA聚合酶 原核DNA聚合酶有Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ 方向:沿着模板链3‘-5‘方向来催化DNA新链的合 成形成的共价键。 延长阶段 滞后链是一段一段合成的,所以5‘-3‘的聚合导致3‘-5‘方向的总的生长。 冈崎片段 复 制 的 终 止 ⑤切除引物,修补空缺 (DNA聚合酶Ⅰ,以它的5‘-3‘核酸外切酶活性去切) 修补空缺(DNA聚合酶Ⅰ ,以它的5‘-3‘DNA聚合酶活性) 复 制 的 终 止 ⑥连接切口(DNA连接酶) 四、真核细胞DNA的复制 P303 第五节 DNA修复 DNA修复系统的基本类型 错配修复 碱基切割修复 核苷酸切割修复 直接修复 重组修复与差错倾向修复 六. DNA的损伤与修复 修复的三个系统: DNA损伤修复系统大致分为三类: 光复活的修复 切除修复 重组修复 其中切除修复最为普遍。 基因重组与DNA”克隆” DNA重组技术 质粒 核酸探针 聚合酶链式反应(PCR)技术

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