实验63 邻二氮菲分光光度法测定微量铁.PDF

实验63 邻二氮菲分光光度法测定微量铁 1.实验目的 （1）掌握分光光度法测定微量铁的原理和方法。 （2）了解分光光度计的构造和使用方法。‘ （3）学习吸收曲线和标准曲线的制作。 2.实验原理 2+ Fe 与水溶液中的邻二氮菲反应，生成一种稳定的、配合比为 1：3 的橙红色螯合物，反 应式如下： 2+ N N 2+ Fe + Fe N N 3 其 1gK稳 = 21. 3 。在510nm附近有最大吸收，且遵守朗伯一比耳定律，摩尔吸光系数 4 ε=1. 1×10。在pH3--9的范围内，螯合物稳定。 该法选择性高，相当于含铁量 40 倍的Sn2+ 3+ 2+ 2+ 2+ 2- , Al , Ca , Mg , Zn , SiO , 20 倍的 3 3+ 2+ 3- 2+ 2+ Cr 、Mn 、V(Ⅴ)、PO 及 5 倍的Co 、Cu 等均不干扰测定。加入盐酸羟胺可防止氧化剂的 4 3+ 2+ 2+ 干扰，使Fe 还原成Fe 。显色时，若pH2，反应进行较慢；若pH太高，则Fe 水解，影响显 色，可用HAc-NaAc缓冲溶液调节酸度。 3. 仪器与试剂 试 剂 ： 10μg·ml-1 铁 标 准 溶 液 （ 准 确 称 取 0.0703g 分 析 纯 的 硫 酸 亚 铁 铵 -1 [(NH) Fe(SO ) ·6HO]于100m1 烧杯中，加入lmol·L HCl溶液 50ml，溶解后移入 1000m1 4 2 4 2 2 容量瓶中，再加入lmol·L-1HC1 溶液 50m1，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。），0.1％邻二氮菲 水溶液（现配，先用少许酒精溶解后，再用水稀释。），1％盐酸羟胺水溶液（现配），pH=4. 6 的HAc-NaAc缓冲溶液（称取 136g分析纯NaAc，加入 120m1 冰醋酸，用蒸馏水溶解后稀释至 500m1。）,铁未溶知液。 仪器：721 型或722 型分光光度计，50mL 比色管，吸量管（5mL，10mL） 4.实验内容 （1）吸收曲线的制作 准确移取10μg·ml-1铁标液6.00ml于50m1比色管中，依次加入1％盐酸羟胺溶液2.5m1、 HAc-NaAc缓冲溶液 5.0m1、0. 1％邻二氮菲溶液 5.0ml，用蒸馏水稀释至刻度后摇匀，放置 l0min。在分光光度计上，用 2cm比色皿，以蒸馏水作参比溶液，采用不同的波长，从 460--530nm，每隔l 0nm测定一次吸光度。然后以波长为横坐标，吸光度为纵坐标绘制吸收 曲线，找出最大吸收峰所对应的波长，此即为最大吸收波长入 。选此波长为测定铁的适宜 max 波长。 （2）标准曲线的制作 分别准确移 10μg·ml-1取铁标液 0.00、2.00、4.00、 6.00、8.00、10.00ml于6 只已编 号的