尿中氟的离子色谱法 - 职业卫生所.PDF

尿中氟的离子色谱法 1 原理 尿样经固相萃取小柱净化后，经阴离子色谱柱分离，电导检测器检测。保留时间定性， 峰面积定量。 2 仪器 2.1 离子色谱仪，IonPac AS15 （250mm×4mm ）分离柱，IonPac AG15 保护柱；配电导检测 器。 2.2 离心机。 2.3 尼龙滤膜过滤头，0.22m 。 2.4 固相萃取小柱，C18 。 3 试剂 3.1 去离子水（18.2Mcm ）。 3.2 甲醇（色谱纯）。 3.3 氟标准贮备溶液[ρ(F)= 1000μg/mL] ：购买国家认可的标准溶液配制。 3.4 氟标准应用溶液A [ρ(F)=100μg/mL] ：用塑料容量瓶将标准储备溶液用去离子水稀释成氟 浓度为100μg/mL 的标准应用溶液。 3.5 氟离子标准应用溶液 B [ρ(F)=10μg/mL] ：用塑料容量瓶将标准储备溶液用去离子水稀释 成氟浓度为10μg/mL的标准应用溶液。 4 样品的采集、运输和保存 按照 《职业卫生生物监测总则》进行样品采集。将采样后的尿液于常温下运输；但夏季 运输需要冷藏。在室温和4 ℃条件下保存样品有效期为7d，在-20 ℃条件下能保存样品有效期 为14d。 5 分析步骤 5.1 仪器操作参考条件 色谱柱：IonPac AS15 （250mm4mm ） IonPac AG15 淋洗液：KOH 溶液（由淋洗液在线发生器生成） 流 速：1.2mL/min 抑制器：抑制电流：179mA 进样量：25L 淋洗液浓度：梯度淋洗模式，淋洗液浓度随时间变化如表1 所示 表1 淋洗液浓度随时间变化表 时间（min ） KOH 浓度 （mmoL/L ） 曲线类型 0 4 5 14 4 5 26 60 5 5.2 标准曲线的配制和测定： 取7个10mL容量瓶，分别加入0.1mL、0.5mL、1.0mL标准应用液B ，加入0.20mL、0.30mL、 0.60mL 、1.00mL标准应用液A ，用去离子水定容至刻度，配制成浓度为0.1mg/L~10.0mg/L 的氟标准溶液。参照仪器操作参考条件测定。以各标准系列溶液的峰面积与氟离子浓度 （mg/L ）计算回归方程。 5.3 样品处理和测定 将尿样放至室温混匀，取样品于离心管中，3000r/min 离心 10min 。离心后的样品用去 离子水稀释3 倍。固相萃取小柱分别用2mL 甲醇和2mL 水活化后，取3.0mL 稀释后的样品 加入活化后的固相萃取小柱，弃去滤液。再取 3.0mL 稀释后的样品加入活化后的固相萃取 小柱进行上样，收集滤液，滤液经0.22µm 的尼龙滤膜过滤后，供测定。用测定标准系列溶 液的操作条件，测定样品空白和样品溶液，由回归方程计算尿中氟的浓度（mg/L ）。 6 结果计算 6.1 按式（1）标准曲线法计算尿中氟的浓度。 C=n∙c∙k…………… （1） 式中： C―尿中氟浓度，mg/L ； k―校正系数； n―尿样稀释倍数； c―从标准曲线得氟的浓度，mg/L 。 6.2 按照肌酐或比重校正方法对样品结果进行校正。 7 说明 7.1 本方法检出限为0.06μg/mL （以3mL 尿计），方法定量下限为0.19μg/mL（以3mL 尿计）； 方法测定范围为 0.19μg/mL~ 10μg/mL，批内精密度范围为 0.71%~2.90% （尿氟浓度为 0.5μg/mL~ 15.4μg/mL），批间精密度范围为1.0%~7.40%（尿氟浓度为0.3μg/mL~ 15.2μg/mL）， 方法加标回收率范围为90.5%~ 101.2% （尿氟加标浓度为0.5μg/mL~ 15.4μg/mL）。 2-