抑制性差减杂交方法克隆重力适应相关基因 - 南京师范大学学报.PDF

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抑制性差减杂交方法克隆重力适应相关基因 - 南京师范大学学报

第 卷第 期 南京师大学报(自然科学版) !$ $ UHW ’!$ .H ’$ 年 ( ) !# QAR-./: A? ./.QS.F .A-T/: R.SUK-+S6V .@INJ@W +3=;D3; !# !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 抑制性差减杂交方法克隆重力适应相关基因 # ! ( $ 胡晓旻 ,孙晓文 ,李喜文 ,刘丽 ( 南京师范大学生命科学学院,南京, ) #’ !#% ( 山东大学附属第二医院泌尿外科,济南, ) ! ’ !)(( ( 东北师范大学细胞与遗传研究所,长春, ) ( ’ #(!$ ( 北京空军总医院分子生物学研究中心,北京, ) $ ’ #(* [摘要] 采用抑制性差减杂交方法,分别从经重力环境改变适应性锻炼(实验组)和未经重力环境改变适应性 锻炼(驱动组)的两组 大鼠的淋巴细胞中分别提取 和 ,并经逆转录酶合成 ,经 酶切 +, -./ 0-./ 123,./ !# 后将实验组 分为 组,分别与两种不同的接头衔接,再与驱动组 进行 次消减杂交及 次抑制性 3,./ ! 3,./ ! ! ,将产物与 载体连接构建 消减文库,并转染大肠杆菌进行文库扩增 随机挑选 个克隆,通过斑 45- 67 / 3,./ ’ 8 点杂交,初步筛选出! 个阳性克隆’ [关键词] 抑制性差减杂交;重力环境;基因克隆 [中图分类号] ; [文献标识码]; [文章编号] ( ) 98) / ## $*#* !# $ 8! * ! ! ! ! 引言 重力既是人类在地球表面生活与劳动过程中无时不在、而又无法摆脱的力学环境,也是迄 今人类尚不够了解的一种环境因素 长期在太空中飞行的人员,其组织、器官、生理及功能在不 ’ 同程度上均发生了一定的改变’ 模拟失重实验显示,心脏尺寸减小,心肌有明显的萎缩性改变, [] [] # ! 心率失常 ,血液流变性降低 重力环境的改变可使细胞基质之

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