抑制性差减杂交方法克隆重力适应相关基因 - 南京师范大学学报.PDF

第 卷第 期 南京师大学报（自然科学版） !$ $ UHW ’!$ .H ’$ 年 （ ） !# QAR-./: A? ./.QS.F .A-T/: R.SUK-+S6V .@INJ@W +3=;D3; !# !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 抑制性差减杂交方法克隆重力适应相关基因 # ! ( $ 胡晓旻 ，孙晓文 ，李喜文 ，刘丽 （ 南京师范大学生命科学学院，南京， ） #’ !#% （ 山东大学附属第二医院泌尿外科，济南， ） ! ’ !)(( （ 东北师范大学细胞与遗传研究所，长春， ） ( ’ #(!$ （ 北京空军总医院分子生物学研究中心，北京， ） $ ’ #(* ［摘要］ 采用抑制性差减杂交方法，分别从经重力环境改变适应性锻炼（实验组）和未经重力环境改变适应性 锻炼（驱动组）的两组 大鼠的淋巴细胞中分别提取 和 ，并经逆转录酶合成 ，经 酶切 +, -./ 0-./ 123,./ !# 后将实验组 分为 组，分别与两种不同的接头衔接，再与驱动组 进行 次消减杂交及 次抑制性 3,./ ! 3,./ ! ! ，将产物与 载体连接构建 消减文库，并转染大肠杆菌进行文库扩增 随机挑选 个克隆，通过斑 45- 67 / 3,./ ’ 8 点杂交，初步筛选出! 个阳性克隆’ ［关键词］ 抑制性差减杂交；重力环境；基因克隆 ［中图分类号］ ； ［文献标识码］； ［文章编号］ （ ） 98) / ## $*#* !# $ 8! * ! ! ! ! 引言 重力既是人类在地球表面生活与劳动过程中无时不在、而又无法摆脱的力学环境，也是迄 今人类尚不够了解的一种环境因素 长期在太空中飞行的人员，其组织、器官、生理及功能在不 ’ 同程度上均发生了一定的改变’ 模拟失重实验显示，心脏尺寸减小，心肌有明显的萎缩性改变， ［］ ［］ # ! 心率失常 ，血液流变性降低 重力环境的改变可使细胞基质之