利用蓝藻生物报告体检测水体中可利用铁的研究.pdfVIP

第36卷第1 期 水生生物学报 Vo l. 36 , No.1 2012 年 1 月 ACTA HYDROBIOLOGICA SINICA Jan. , 2012 DOI: 10.3724/SP.J.1 035.2012.00073 利用蓝藻生物报告体检测水体中可利用铁的研究 查士红1 ， 2 徐旭东1 胡晗华1 (1.中国科学院水生生物研究所，武汉 430072; 2. 中同科学院研究生院，北京 100049) 摘要:负腥藻 PCC 7120 中的 0lr2581 基因编码的蛋白质在缺铁胁迫时显著上调。将该基间的启动子 Polr2581 和费氏弧菌的luxAB基因融合，通过同源单交换，整合到鱼腥藻PCC 7120 的基因组上，构建了可以感知环境 中铁的生物报告体Palr2S81-luxAB。该藻株在不含铁的 BGII 中培养时，启动子Palr2S81 的转录活性增强， LuxAB 酶活显.著升高。通过测定 Palr2S81-luxAB 藻株在不同铁浓度 Fraquil 培养基中的 LuxAB 酶活，得到了铁浓度 3 3 pFe(-lg[Fe +])与 LuxAB 酶活的剂量反庇曲线。结果显示， 12h 时， LuxAB 酶活随缩养基中 Fe +浓度增加呈 S 形递减关系，其中在 pFe=20.7一2 1.2 植围内有很好的线性关系。根据这一特性，我们利用 Polr2S81 -luxAB 作为 铁的生物报告体，测定了武汉市东湖水体中可利用的铁浓度为 10却56 mollL。研究显示，通过这一方法可以 较方便地监测各种淡水中可利用的铁浓度。 关键词:鱼腥藻 PCC 7120; 生物报告体;铁;东湖 中图分类号: Q178.53 文献标识码:A 文章编号: 1000-3207(2012)01-0073-05 细菌能合成 siderophore，这种物质可以整合环 /uxAB 的藻株 Palr2581-/uxAB， 在缺铁的 BGll 中， 3 境中的 Fe气形成siderophore-Fe +复合体(1) 。革兰氏 LuxAB 酶活在 12h 内就有大幅度的上升。因此， 3 3 阴性菌(如蓝薄)的外膜上存在 siderophore-F e +复合 Alr2581 可能是 siderophore-Fe +复合体的外膜受体， 体的受体，这些受体依赖细胞外膜上的 TonB 复合 受缺铁胁迫诱导表达。 3 体，将 siderophore-Fe +复合体转运进周质腔中，然 铁是生物体生长所必需的一种重要营养元素， 同时也是海洋[9， 10] 、沿海水域川和湖泊[12， (3) 中浮游 后在周质腔特定的结合蛋白和 ABC 转运体的作用 下，运输到细胞质中IIJ10 鱼腥藻是一种丝状罔氮蓝 植物生产力的重要限制因子。与铁相关的蛋白质参 藻，缺铁时细胞可以合成siderophore: 如schizokinen