色谱分析原理及应用.pptVIP

III 篇章 色谱分析法 第19章 色谱法分离原理 第一节 色谱法概述 一、 色谱法的特点、分类和作用 色谱法 2.色谱法分类 液相色谱 其他色谱方法 一、色谱流出曲线 （2）用体积表示的保留值 3. 相对保留值r21 4. 区域宽度 二、容量因子与分配系数 一、塔板理论-柱分离效能指标 有效塔板数和有效塔板高度 塔板理论的特点和不足： 二、 速率理论-影响柱效的因素 1. 涡流扩散项－A 2. 分子扩散项—B 3.传质阻力项— C 4. 载气流速与柱效-最佳流速 5. 速率理论的要点 第四节 分离度 分离度的表达式： 例题1： 例题2： 第五节 定性和定量分析 一、色谱定性鉴定方法 3.保留指数p380 保留指数计算方法 3.与其他分析仪器联用的定性方法 二、 色谱定量分析方法 2. 定量校正因子 3. 常用的几种定量方法 （1）归一化法： （2）外标法 （3）内标法 内标法特点 气相色谱.ppt 分离度与柱效（动力学因素），选择因子（热力学因素），和容量因子（容量因素）有关 α＝1,　分不开 改变流动相的组成；温度；固定相组成；特殊反应． n,改变流动相的流速，黏度；液膜厚度，柱长 k,1-5 在一定条件下，两个组分的调整保留时间分别为85秒和100秒，要达到完全分离，即R=1.5 。计算需要多少块有效塔板。若填充柱的塔板高度为0.1 cm，柱长是多少？ 解： r21= 100 / 85 = 1.18 n有效 = 16R2 [r21 / (r21 —1) ]2 = 16×1.52 ×(1.18 / 0.18 ) 2 = 1547（块） L有效 = n有效·H有效 = 1547×0.1 = 155 cm 即柱长为1.55米时，两组分可以得到完全分离。 在一定条件下，两个组分的保留时间分别为12.2s和12.8s，计算分离度。要达到完全分离，即R=1.5 ，所需要的柱长。n=3600 解： 分离度： 塔板数增加一倍，分离度增加多少？ 1.利用纯物质定性的方法 利用保留值定性：通过对比试样中具有与纯物质相同保留值的色谱峰，来确定试样中是否含有该物质及在色谱图中位置。不适用于不同仪器上获得的数据之间的对比。 利用加入法定性：将纯物质加入到试样中，观察各组分色谱峰的相对变化。 2.利用文献保留值定性 相对保留值r21：相对保留值r21仅与柱温和固定液性质有关。在色谱手册中都列有各种物质在不同固定液上的保留数据，可以用来进行定性鉴定。 又称Kovats指数（Ⅰ），是一种重现性较好的定性参数。测定方法： 将正构烷烃作为标准，规定其保留指数为分子中碳原子个数乘以100（如正己烷的保留指数为600）。 其它物质的保留指数（IX）是通过选定两个相邻的正构烷烃，其分别具有Z和Z＋1个碳原子。被测物质X的调整保留时间应在相邻两个正构烷烃的调整保留值之间如图所示： 小型化的台式色质谱联用仪（GC-MS；LC-MS） 色谱-红外光谱仪联用仪； 组分的结构鉴定 Sample Sample 5890 1.0 DEG/MIN HEWLETT PACKARD HEWLETT PACKARD 5972A Mass Selective Detector D C B A A B C D Gas Chromatograph (GC) Mass Spectrometer (MS) Separation Identification B A C D 1. 峰面积的测量 （1）峰高（h）乘半峰宽（Y 1/2）法：近似将色谱峰当作等腰三角形。此法算出的面积是实际峰面积的0.94倍： A = 1.064 h·Y1/2 （2）峰高乘平均峰宽法：当峰形不对称时，可在峰高0.15和0.85处分别测定峰宽，由下式计算峰面积： A = h·（Y 0.15 + Y 0.85 ）/ 2 （3）峰高乘保留时间法：在一定操作条件下，同系物的半峰宽与保留时间成正比，对于难于测量半峰宽的窄峰、重叠峰（未完全重叠），可用此法测定峰面积： A = h·b·tR （4）自动积分和微机处理法 试样中各组分质量与其色谱峰面积成正比，即： m i = fi ·Ai 绝对校正因子