第4章 细胞的破碎与分离.ppt

细胞壁结构和化学组成 2 概述 1 4 细胞的破碎与分离 基因工程表达产物后处理的特殊性 4 细胞壁的破碎 3 4.1 概述 4.2 细胞壁结构和化学组成 1 2 细菌 真菌和酵母 3 藻类 4.2.1 细菌 4.2.1 细菌 接上图 （１）肽聚糖 （２）氨基酸 （３）磷壁质 （４）糖 （５）脂质 4.2.1 细菌 4.2.2 真菌和酵母 （１）糖及其氨基衍生物 （２）氨基酸 （３）脂质 藻类细胞壁非常复杂，其主要结构成分，与其他真核生物一样，是纤丝状的多糖类物质。 4.2.3 藻类 4.3 细胞壁的破碎 1 2 破碎率的评价 细胞破碎的方法 4.3 细胞壁的破碎 破碎率定义为被破碎细胞的数量占原始细胞数量的百分比，即： （１）直接计数法 （２）间接计数法 4.3.1 破碎率的评价 4.3.2 细胞破碎的方法 （１）固体剪切方法（珠磨） 4.3.2 细胞破碎的方法 ①理论依据 破碎作用将遵循一级动力学定律： 4.3.2 细胞破碎的方法 4.3.2 细胞破碎的方法 ②破碎的速率和效率 ａ．转盘外缘速度 破碎效率E被定义为： ｂ．细胞浓度c 4.3.2 细胞破碎的方法 ｃ．珠粒大小 ｄ．温度 ｅ．流量Q （２）液体剪切方法 4.3.2 细胞破碎的方法 破碎分率与悬浮液通过匀浆器的次数有关，也服从一级反应定律： 4.3.2 细胞破碎的方法 4.3.2 细胞破碎的方法 4.3.2 细胞破碎的方法 （３）超声波法 ①理论依据 在用于细胞破碎的容器中，流体动力学按照完全混合方式，蛋白质释放动力学遵循一级反应定律： 4.3.2 细胞破碎的方法 ②超声波破碎的影响因素 ａ．振幅 ｂ．细胞悬浮液的黏度 ｃ．表面张力 ｄ．被处理悬浮液的体积 ｅ．珠粒的体积和直径 ｆ．探头的形状和材料 ｇ．细胞悬浮液的流速 （４）其他破碎方法———非机械法 4.3.2 细胞破碎的方法 ①酶法溶胞 ②化学法 ③物理法　包括渗透压冲击法、冻融法和干燥法。 ④其他方法 4.3.2 细胞破碎的方法 4.4 基因工程表达产物后处理的特殊性 Thank you