脐血造血干_祖细胞及脂肪干细胞共培养的作用距离研究.pdfVIP

第25 卷第5 期 高 校 化 学 工 程 学 报 No.5 Vol.25 2011 年10 月 Journal of Chemical Engineering of Chinese Universities Oct. 2011 文章编号：1003-9015(2011)05-0809-07 网络出版地址：/kcms/detail/33. 1141.TQ1441.001.html 脐血造血干/祖细胞与脂肪干细胞共培养的作用距离研究 宋克东1 1 1 1 1 2 3 3 1 4 , 刘天庆 , 武 爽 , 郭文华 , 郝永杰 , 方美云 , 石芳鑫 , 朱丽丽 , 马学虎 , 崔占峰 (1. 大连理工大学 干细胞与组织工程研发中心, 辽宁省 大连市 116024; 2. 大连医科大学附属第一医院 血液科, 辽宁省 大连市 116011; 3. 大连医科大学附属第一医院 妇产科, 辽宁省 大连市 116011; 4. 牛津大学 工程科学系生物医学工程研究中心, 英国 牛津 OX3 7DQ) 摘 要：设计了一种细胞间距可调的transwell 共培养方法，以研究脐带血来源的造血干/祖细胞(HS/PCs)和人脂肪干细 胞(human-adipose derived stem cells, h-ADSCs)体外共培养时细胞间作用距离对造血干细胞扩增能力和脂肪干细胞在共 培养后干细胞特性的影响。采用不同规格的砂纸打磨孔板的上壁面，经高精度游标卡尺测量，使两种细胞之间的有效 接触间距为 10~450 μm 不等。然后以h-ADSCs 为基质细胞，分别考察HS/PCs 和h-ADSCs 在不同的作用距离下的共培 养情况。其间每24 小时对细胞进行计数，观察细胞形态。培养7 天后对MNCs 表面抗原CD34+ 、CFU-GM 集落扩增 倍数进行了检测；同时也对h-ADSCs 表面抗原(CD13、CD29 、CD34、CD44、CD45 、CD73 、CD105 、CD166 、HLA-DR) 及其多向分化潜能(成骨、成软骨、成脂肪)进行分析以鉴定其干细胞性能。结果表明，通过 transwell 共培养，细胞之 间在作用距离为350 μm 时HS/PCs 的扩增效果最好，其中造血MNCs 扩增了 15.1±0.2 倍, CD34+扩增了5.0±0.1 倍；扩 增的h-ADSCs 表达CD29 、CD44 、CD166 ，而不表达CD34、CD45，且在适当诱导条件下可以向成骨细胞、软骨细胞、 脂肪细胞分化。 关键词：脂肪干细胞；造血干/祖细胞；transwell ；共培养；脐带血 中图分类号：R343.6 文献标识码：A DOI ：CNKI:33-1141/TQ1441.001 Effective Action Distance of Co-Culture between Umbilical Cord Blood-Derived Hematopoietic Stem/Progenitor Cells and Human Adipose Derived Stem Cells 1 1 1 1 1 2 SONG Ke-dong , LIU