RibonucleaseInhibitor重组核糖核酸酶抑制剂-ThermoFisher.PDF

Ribonuclease Inhibitor 重组核糖核酸酶抑制剂 货号： 规格：5,000 Units 浓度：40 U/µl 储存于 -20℃ (参见下面的储存注意事项) 产品描述 该重组核糖核酸酶 (RNase) 抑制剂是胰型核糖核酸酶 (如 RNase A) 的强效非竞争性抑制剂，该产品为猪肝脏核糖核酸酶抑 制剂基因在重组大肠杆菌中的表达产物，经亲和层析纯化后得到。与其他胰型核糖核酸酶抑制剂类似，该产品为酸性蛋白质， 分子量约为 52 kDa ，与 RNase A 等胰型核糖核酸酶具有极高的亲和结合力。该产品是胰型核糖核酸的非竞争性抑制剂，通 过与牛胰腺 RNase A 形成 1:1 的复合物来实现其抑制作用。该产品能够抑制 RNase A、RNase B 和 RNase C 的活性，但对 RNase 1、RNase T1、RNase T2、S1 核酸酶和 RNase H 的活性没有抑制作用。 储存缓冲液 20 mM Tris-HCl (pH 8.0)、50 mM KCl、0.5 mM EDTA 、8 mM DTT 及 50% (v/v) 甘油。 储存注意事项 避免将产品放置于温度剧烈变化的环境中，使用时建议将该产品放置于冰盒内或冰浴上，使用完毕后应立即放置于 -20℃冰 箱内保存。此核糖核酸酶抑制剂需要 1 mM DTT，以维持活性。 该产品仅适用于实验室研究使用。注意：不适用于诊断用途。该产品在诊断或者其他临床应用上的安全性和有效性方面尚未 经过验证。 质量控制 单位定义：一个活性单位为抑制5 ng RNase A 50%活性所需的核糖核酸酶抑制剂的量。此活性是通过检测该产品抑制RNase A 水解胞嘧啶 2’, 3’-环单磷酸的效率来测定的 (1)。 纯度：经 12.5%SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定，该核糖核酸酶抑制剂的纯度高于90%。比活性 80,000 units/mg。 核酸内切酶 (切口) 分析：分别将50、100 和200 单位的该核糖核酸酶抑制剂与1 µg φX174 RF DNA 混合，37℃ 孵育60 分钟，与 对照组 (未加入任何核糖核酸酶抑制剂) 相比，未观察到 DNA 被切为开放环状 (II 型) 或线性 (III 型)。 RT-PCR ：与对照批号组相比，该核糖核酸酶抑制剂对PCR 产物确无抑制作用。 应用 cDNA 合成：在加入到反应混合液体系 (40 units/20 µl 反应混合液) 中时，该核糖核酸酶抑制剂能够保护mRNA 不被降解， 从而提高总cDNA 产量，包括全长cDNA 在总cDNA 中的百分比。 RT-PCR ：该核糖核酸酶抑制剂与RT-PCR 中所使用的所有酶能够兼容。例如，该产品曾应用于基于Elongase®酶反应混合物 的长时间RT-PCR 反应中 (40 units/20 µl 反应混合液)。 体外转录：研究表明，在使用T3 、T7 和SP6 RNA 聚合酶进行全 RNA 体外转录实验中，该核糖核酸酶抑制剂可有助于获得更 多完整的RNA 分子 (20-40 units/10 µl 反应混合液)。 参考文献 Blackburn, P. (1979) J. Biol. Chem . 254, 12484-12487. 仅限于科研使用，请勿用于动物或人类的疾病诊断及治疗。 企业名称：上海立菲生物技术有限公司 (原上海英骏生物技术有限公司) 工厂地址：北京经济技术开发区荣昌东街7号隆盛工业园203 邮编：100176 技术支持热线：800 820 8982 或 400 820 8982 技术支持邮箱：cntechsupport@