第五章核酸生物化学.PDFVIP

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2017-06-27 发布于天津
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第五章核酸生物化学.PDF

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第五章核酸生物化学

生物化学第五章核酸第四节核酸的性质一、核酸的水解（一）酸水解对酸的敏感性：糖苷键＞磷酸酯键嘌呤糖苷键＞嘧啶糖苷键利用酸水解可以研究核酸的碱基组成。（二）碱水解 RNA的磷酸酯键对碱敏感。 DNA抗碱水解。生理意义： DNA更稳定，遗传信息。 RNA是DNA的信使，完成任务后迅速降解。第四节核酸的性质一、核酸的水解（三）酶水解非特异的磷酸二酯酶：蛇毒磷酸二酯酶水解DNA （RNA）得5’-核苷酸牛脾磷酸二酯酶水解DNA （RNA）得3’-核苷酸特异的磷酸二酯酶：核酸酶核酸酶 1、核酸酶的分类底物专一性：核糖核酸酶 RNase 脱氧核糖核酸酶 DNase 作用方式：核酸外切酶（exonuclease)、核酸内切酶(endonuclease)。单链核酸酶、双链核酸酶、杂链核酸酶磷酸二酯键的断裂方式： 5’- （寡）核苷酸 3’- （寡）核苷酸核酸酶 2、RNase RNase H 作用于DNA-RNA中的RNA链牛胰核糖核酸酶（pancreatic ribonuclease) , RNase I 最适pH ：7.0-8.2 产物：以3’-嘧啶核苷酸结尾的寡核苷酸，高度专一的内切酶 RNase T1 耐热、耐酸产物：以3’-鸟苷酸结尾的寡核苷酸，专一性更高 RNase T2 产物：以3’-腺苷酸结尾的寡核苷酸核酸酶 3、DNase 核酸酶S1 作用于单链DNA部分牛胰核糖核酸酶，DNase I 切断双链或单链DNA 产物：以5’-磷酸为末端的寡核苷酸 DNA限制性内切酶具有非常严格的碱基序列专一性 4、N-糖苷酶以限制性内切酶及连结酶进行核酸剪接 GAATTC GAATTC CTTAAG CTTAAG EcoRI G AATTC G AATTC CTTAA G CTTAA G G G AATTC AATTC CTTAA CTTAA G G EcoRI sticky end DNA Ligase EcoRI sticky end G AATTC CTTAA G Juang RH (2004) BCbasics 目标基因殖入质