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出凝血2.1凝血酶原时间(PT)测定(第四版)
出凝血2.2原理:
待测血浆加入过量的含钙组织凝血活酶,使凝血酶原转变为凝血酶,后者使纤维蛋白原转变为纤维蛋白,测定凝固所需时间,即为待测血浆凝血酶原时间。是外源性凝血系统较理想和常用的筛选试验。
出凝血2.3标本处理:
患者处于休息状态下,采空腹静脉血(急诊病人除外)。采血者应技术熟练,“一针见血”,以防止组织损伤,使外源性凝血因子进入标本。最好不与其它实验一起采集而使血液停留在针管的时间延长。采完血后,将血液沿管壁缓缓注入试管,避免产生气泡;然后迅速将血液和抗凝剂轻轻颠倒混匀,避免用力震荡。
全血要在1小时内分离血浆。分离乏血小板血浆时,要在室温下3000rpm离心10分钟,室温下可存放4小时。全部试验不能在4小时内完成,应将乏血小板血浆分装在0.5~1.0ml的小试管中快速冷冻,储存于-20℃冰箱中。冷冻过的标本不能再次冷冻,否则结果会不准确。冷冻血浆融化时,应将盛冷冻血浆的容器置于37℃水浴中,并轻轻摇动,使其迅速融化。
出凝血2.4试剂:
PT试剂购于天津威士达公司: 德灵Thromborel S试剂,试剂盒代号OUHP29。试剂包括人脑凝血活酶冻干粉;氯化钙和稳定剂。每瓶试剂用蒸馏水4ml复溶。室温平衡15min后上机分析。
出凝血2.5仪器:使用Sysmex公司的CA-7000型全自动血液凝固仪。
出凝血2.6操作:按仪器操作步骤执行标准操作。
出凝血2.6.1开机:按下机器侧面的POWER 按钮。开机后机器进行自检,当屏幕上边显示“Ready:”时可以进行试验。
出凝血2.6.2检查消耗品:
1、准备反应杯:打开仪器上盖装反应杯的盖子查看反应杯是否够量,不足时,需及时添加。(一次性最多可放1000 个杯子)
2、准备试剂:按照仪器对试剂的要求,把试剂准备好,放到仪器内相应位置,注意查看试剂的量和有效期。如还不熟悉试剂位置时,可在主屏幕上选Reagent Setting,按屏幕显示放置试剂。
3、查看仪器的洗液瓶和废液瓶
出凝血2.6.3准备标本:将样本放入样本架,再将样本架放到仪器进样器上。
出凝血2.6.4输入检测项目:主菜单上按下Work List 键,进入工作菜单,输入PT项目。
出凝血2.6.5输入样本号: 按屏幕下菜单的ID No.键,按顺序输入样本的序号。
出凝血2.6.6开始检测:录入完所有测试信息,按下屏幕右上角START 键,开始检测。
出凝血2.7质量控制:使用德灵公司的leve11质控品做质量控制。每批质控品的值不超过2SD。(详见出凝血1质量控制)
出凝血2.8 计算:仪器自动计算出结果。
出凝血2.9 参考值:PT:10s~s ;INR: 0.85~1.15
2.10 临床意义:PT是外源性凝血系统的筛选实验。
PT延长见于先天性凝血因子II、V、VII、X缺乏症,低(无)纤维蛋白原血症,DIC,原发性纤溶症,VitK缺乏,肝病,口服抗凝剂、肝素和FDP等。PT缩短见于先天性凝血因子V增多,口服避孕药,高凝状态,血栓性疾病等。
出凝血2.11 参考文献.止血与血栓检验技术.(第一版1992.6)上海科学技术出版社.
操作规程
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