日本乙型脑炎实验室诊断方法的研究和应用.pdfVIP

日本乙型脑炎实验室诊断方法的研究和应用 E基因是乙脑病毒主要抗原基因。采用E基因的表达产物作为包被抗原，替 代全病毒作为包被抗原，可以减少操作人员被感染和应用全病毒ELISA试剂盒造 成环境污染的风险。本研究通过大肠杆菌表达乙脑病毒主要抗原基因E基因，选 择最佳的表达条件，提取、纯化表达蛋白形成的包涵体，用提纯的包涵体包被ELISA 板来检测乙脑抗体，确定最佳的包被条件，确定阴阳性界限值，建立了乙脑E蛋 白的ELISA诊断方法。用该方法对引起猪繁殖障碍的其它传染病做了检测，检测 结果均为阴性；随机抽取了6份不同抗体水平的血清，用不同批次包被的酶标板进 行检测，结果变化不大：用该方法和血凝抑制对97份血清进行同步检测，两者符 O％，用该方法和全病毒ELISA方法对 合率为958％，比血凝抑制试验阳性率高2 送检的97份血清进行了同步检测，两者符合率为95．8％；检测结果表明该方法特 异性强、敏感性高、重复性好。用建立的该方法对送检的892份血清进行了检测， 其中阳性血清422份，阳性率达47．3％。以上结果说明该方法可以替代全病毒ELISA 方法用于流行病学调查和血清学诊断。 关键词： R本乙型脑炎；全病毒ELISA；RT-PCR；E蛋白ELISA 旦至圣型堕壅壅墼皇堡堑查鎏墅塑窒翌皇里 ABSTRACT aviral diseaseof humans Japaneseencephalifis(疤)is and animals．caused by member Japanese ofthe encephalitisvirus(JZV)，a Flaviviridae．JE family causes illnesses inhumansand neurological leadsto isthe porcine reproductiveobstacle．Pig host-Humancarlbeinfected is to spread bymosquitos．It and importantdiagnoses of forhuman and preventJapaneseencephalitis animals’health．Thereforhe following were studiescarriedout． ofELISAandELISATest Kit 】．Developme