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未成熟新生大鼠hi后脑组织vegf表达和血管新生的研究毕业论文
来成熟新生火鼠HI后脑纰织VEGF表达雨…【管新生的研究
次。对照组大鼠在同时问注射等量生理盐水。
3.脑形态组织学检查
术后1d、3d、7d时各组分别处死4只大鼠,脑组织于10%中性甲醛固定。
观察缺氧缺血前后动物行为改变及脑形态学改变。
4.免疫组织化学染色和量化
脑组织石蜡切片行免疫组织化学染色,以VEGF小鼠抗大鼠lgG单克隆
抗体标记VEGF,采用全自动图像分析系统分析VEGF阳性单位表达的灰度
值;以CD31兔抗大鼠IgG多克隆抗体标记微血管,高倍镜下计数热点区微血
管数。
5.R1乙PCR
丹参组和对照组于术后1d、3d、7d时各处死4只大鼠,取缺氧缺血侧脑
和正常值(假手术组)比较。
6.统计学分析
结果以均数±标准差(X!s)表示。各组数据采用析因分析,同一天组间
均数比较采用单因素方差分析,p0.05为差别有统计学意义。
[结果]
1.新生大鼠ItlBD模型的表现和病理改变
所有HIBD模型组大鼠均有躁动、发绀、嗜睡、易激惹等表现,复氧后足
月组出现平衡异常及左旋现象,爬行时右后肢呈拖步,睁眼后左眼眼裂比右
眼眼裂小:早产组也有平衡异常,但其他表现少见。形态学检查见左大脑皮
质神经元细胞水肿、变性、坏死、核固缩,胶质细胞增生;早产:组还¨丁见白
质水肿,结构疏松;丹参治疗组水肿变性等改变均较对照组轻。
2.脑组织VEGF免疫组化染色结果
正常新生大鼠和HIBD模型组大鼠在神经元、内皮细胞、软脑膜细胞、胶
质细胞等均可见VEGF表达。各处理组之间总的VEGF表达有统计学差异(F
Il
来成熟新生大鼠m后脑组织VEGF表达和血管新生的研究
组假手术组。P3对照组皮质VEGF表达HI后第ld、3d和假手术组差别有
统计学意义(17.40+3.64 VS.10.51±1.53,
VS.13.13+1.33,pO.01;13.81±1.38
VS.
13.81±1.38,22.12±1101
VS.11.27±1.01,
达HI后第1d、3d和假手术组差别有统计学意义(17.39+2.56
pO.01;16.00±1.61
VS.11.42±1.99,pO.01),治疗组均值大于对照组,但差
别无统计学意义。白质各组问差别无统计学意义。
3.脑组织新生血管的形成
P3、P7假手术组皮质见少量新生血管,模型组见新生血管增多。早产和
足月组之间总的新生血管数的差异有统计学意义(F=5.884,口=0.017),早
产组新生血管数,足月组;各处理组之间总的新生血管数的差异有统计学意义
对照组皮质新生血管数Hl后第1d、3d和假手术组差别有统计学意义(2.55
±0.16
VS.1.554-0.31,pO.05:5.33±0.85VS.2.67±0.27,pO.01),治疗组
HI后第1d、3d、7d新生血管数均比假手术组多,差别有统计学意义(4.55±
0.87VS.L55±0.31,5.674-0.98VS.2.67±0.27,7.00±0.78VS.4.56±0.57,
4-
VS.2.55
pO.01),且第1d、7d和对照组相比差别有统计学意义(4.55±0.87
0.16,7.00±0.78
VS.1.78±0.57,5.50±O.43VS.
3d、7d和假手术组差别有统计学意义(4.25±0.99
有统计学意义(4.89±0.96VS.1.11±0.16,4.86±0.25VS.1.78±0.57,6.25±
O.
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