生脉胶囊对慢性心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡的影响论文.docVIP

　　生脉胶囊对慢性心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡的影响论文 .freelai capsules on cadiocyte apoptosis ale rats ly divided into 5 groups：sham-operation group (A), CHF model group (B), CHF model treated by Shengmai capsules group (C), CHF model treated by Captopril group (D),.freelodel treated by Shengmai capsule and Captopril group (E). Suprarenal abdominal artery constriction odels. After 7 yocardia Bcl-2 in rats yocardia yocardia Bcl-2 ai capsules can heighten the concentration of anti-apoptosis protein Bcl-2, prevent apoptosis in myocardium and relieve the ventricular remodeling of CHF rat. Key ai capsules；apoptosis；Bcl-2；ventricular remodeling；rat 心室重构是心力衰竭发生发展的根本原因1,而细胞凋亡 在心力衰竭心室重构过程中占重要地位。生脉胶囊是治疗慢性心力衰竭的有效中药制剂,我们发现其能改善心功能并且具有一定的抗心室重构的作用2。其作用是否与抑制细胞凋亡有关？本实验采用腹主动脉缩窄法复制大鼠慢性心力衰竭模型,探讨生脉胶囊对心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡率及抑制凋亡蛋白Bcl-2的影响。 1 材料与方法 1.1 主要仪器 BM-VⅡ型生物组织包埋机(孝感市宏业医用仪器有限公司),石蜡切片机(SHANDON),Leica DC100图像分析仪(德国)。 1.2 药物与试剂 生脉胶囊(杭州正大青春宝药业有限公司,0.3 g/粒,由人参、麦冬、五味子组成,批号0503003),卡托普利片(汕头金石制药总厂,批号050901),注射用青霉素钠(哈药集团制药总厂,批号。乌拉坦(上海曹杨第二中学化工厂,批号050403),水合氯醛(上海青析化工科技有限公司,批。大鼠细胞凋亡检测试剂盒(批号200607)、大鼠Bcl-2一抗(批号200606)、SABC试剂盒、DAB显色试剂盒均为武汉博士德公司产品。 1.3 动物与分组 雌性SD大鼠75只,体质量为190～210 g,SPF级,广州中医药大学实验动物中心提供(许可证号：SYXK(粤)2003- 0001)。将大鼠随机分为假手术组、心衰模型组、生脉胶囊组、卡托普利组、生脉胶囊＋卡托普利组,每组15只。因大鼠在造模后部分死亡,补做18只,共用大鼠93只。实验在广州中医药大学实验动物中心SPF级实验室完成。 1.4 造模 采用腹主动脉缩窄法复制慢性心力衰竭大鼠模型3-4。大鼠以100 g/L乌拉坦(10 mL/kg)麻醉后,从剑突至脐沿正中线作一皮肤切口,钝性分离肌肉,打开腹腔,于双侧肾动脉上方分离腹主动脉,并在其下穿一根4号医用丝线,将一个去掉针尖的直径约0.80 mm的8号注射针头紧贴腹主动脉平行放置,将针头与腹主动脉一起结扎紧后,轻轻抽出针头,使该处腹主动脉横切面积缩窄为原来的40%～50%左右,缝合腹壁。术后腹腔注射青霉素钠(1×104 U/只),每日1次,共5 d,预防感染,常规饲养,造模时间为7周。假手术组在双侧肾动脉上方的腹主动脉下穿线后打一较大的松结,而不缩窄腹主动脉,其他同模型组。 1.5 给药 生脉胶囊组：将生脉胶囊用蒸馏水配成混悬液,按成人9粒/d的剂量根据贺氏5剂量-体表面积换算成大鼠剂量的2倍灌胃。假手术组和心衰模型组：均以等容积蒸馏水灌胃。卡托普利组：将卡托普利片用蒸馏水配成混悬液,按成人150 mg/d的剂量根据体表面积换算成大鼠的剂量的2倍灌胃。生脉胶囊＋卡托普利组：按大鼠体表面积换算的剂量的2倍以生脉胶囊和卡托普利片混悬液灌胃。各组均于造模后第50日开始给药,每日上午灌胃1次,连续7周。 1.6 心肌标本的采集与石蜡切片的制作 治疗后7周,以10%水合氯醛麻醉大鼠后,摘取心脏,以冰冷的生理盐水冲洗去血液,小心剪去连接心脏的血管,沿房室交界处剪去心房、沿两心室间交界处剪去右心室,余下的为左心室肌,取部分侧壁左心室肌,以10%甲醛中固定。每组随机取8个经甲醛固定的心肌组织标本,经梯度酒精脱水、二甲苯透明、石蜡包埋、切片