白血病细胞中NFκB调控MDR1基因、P糖蛋白及逆转耐药的研究论文.docVIP

　　白血病细胞中NFκB调控MDR1基因、P糖蛋白及逆转耐药的研究论文 王漪，刘心，张海涛，余敏，王晖 【摘要】 本研究探讨NFκB调控的血液肿瘤细胞抗凋亡机制中是否有mdr1的参与，并通过对NFκB的抑制希望获得血液肿瘤的耐药逆转，为难治性白血病的治疗探索一条新的道路。取不同终浓度的NFκB抑制剂PDTC作用的，或者同一浓度作用不同时间后的K562/A02细胞.freeldr1的活性，通过统计学来分析mdr1、Pgp的表达是否与NFκB的活化有关。结果表明：随着NFκB抑制剂PDTC作用浓度的不断升高、作用时间的不断延长，K562/A02细胞NFκB/p65的表达不断降低，Pgp和mdr1 mRNA的表达也逐渐降低，而且三因子之间均有显著相关性。结论： 通过对K562/A02细胞高表达的NFκB的抑制可降低该细胞的mdr1 mRNA和Pgp的表达，从而提高血液肿瘤细胞的放化疗敏感性。 【关键词】 PDTC NFκB Regulating Expression of MDR1 Gene and Pgp to Reverse Drugresistance in Leukemic Cells Abstract This study dr1 participates in antiapoptotic mechanisms of hematologic malignant cells regulated by NFκB and to explore the reversal effect of inhibiting NFκB on drugresistance of hematologic malignant cells so as to search a novel ent of refractory leukemia. NFκB activity and Pgp expression in K562/A02 cells cultured e munohistochemistry and puterized picture analysis. The mdr1 erase chain reaction, and the relationship among NFκB , Pgp and mdr1 dr1 e dependent manner. It is concluded the mechanism of NFκB regulating antiapoptosis in K562/A02 cells has the correlation dr1 and Pgp. The expression of mdr 1 mRNA and Pgp can be reduced through inhibiting NFκB in K562/A02 cells, so that the sensitivity of chemical therapy can be enchanced on hematologic malignant cells. Key atol 2007; 15(5):950-954 白血病的多药耐药性是导致化疗失败、疾病复发及难以根治的主要原因，是目前临床上亟待解决的难题之一。新近研究发现mdr1及其产物Pgp高表达是耐药的主要机制。白血病细胞MDR现象就是指白血病细胞mdr1基因及其产物Pgp过度表达导致细胞药物外排增加，降低白血病细胞内化疗药物浓度，白血病细胞由此逃避化疗药物的杀伤而产生耐受现象［1］。因此，应用针对耐药肿瘤细胞Pgp高表达的逆转剂是解决耐药的关键。现研究较多的一类基因调控子NFκB已被证实可调控多种实体瘤（乳腺癌、肝癌、结肠癌等）的mdr1基因表达。本实验通过研究NFκB和mdr1在恶性血液病耐药细胞株中的关系，明确NFκB调控的血液肿瘤细胞抗凋亡机制是否有mdr1的参与，并可提供在恶性血液病耐药这一难题上一种可能的逆转耐药的途径，预期应用此新方法，并与现有的其他方法联合，会在逆转白血病细胞耐药中起显著效果，为进一步提高血液恶性肿瘤的疗效作出贡献。 材料和方法 主要试剂 二硫氨基甲酸酞吡咯烷（Pyrrolidinedithiocarbamic PDTC）购自Alexis Biochemicals公司，先用无血清RPMI 1640培养液配制成10 mmol/L的贮存液，细胞干预前将贮存液用完全培养液稀释成所需浓度。中国实验血液学杂志 J Exp Hematol 2007; 15(5)白血病细胞中NFκB调控MDR1基因、P糖蛋白以及逆转耐药的研究兔抗人NFκB/p65多克隆抗体购自武汉博士德生物工程有限公司。鼠抗人P