7关于生化中的终点法中的两点法.docVIP

关于生化中的终点法中的两点法，还有种叫法是固定时间法的一些题 新手上路，有哪位大侠能先容先容终点法中的两点法的原理，在生化上怎么往做两点法呀 （简单回答）最基本的生化反应方法有三种，其他的都是在此基础演变而来。 1。速率法，有叫动态法，仪器连续检测生化反应过程中的吸光度变化，目的是得到吸光度变化速率。酶活性的检测大多用此方法。检测底物的是下降反应，又叫负反应，例如：ALT AST 等；检测天生物的是上升反应，又叫正反应，ALP。 2。终点法。仪器检测生化反应某一时间点的吸光度值，目的得到反应溶液的具体吸光度值。常见的有GLU，TP ，ALB 等 3。两点法。仪器检测生化反应两个时间点的吸光度值，第二点减往第一点，得到吸光度的差值，检测底物的差值为负，检测天生物的差值为正，例如，中生试剂的肌酐项目Cr。 生化仪无论半自动或全自动，都有实验参数设置，只要按试剂说明正确设置，再照试剂说明做实验就行了。使用分光光度计另当别论。 两点法：又称为一级动力学法、固定时间法等，指在一定的反应时间内，反应速度与底物浓度的一次方成正比，即v=k[S]。由于底物在不断的消耗，因此整个反应速度在不断的减小，表现为吸光度的变化越来越小。这类反应达到平衡的时间很长，理论上可以在任意时间段进行监测，但由于血清成份复杂，反应刚启动时反应较复杂，杂反应较多，必须经过一段延迟时间才能进进稳定反应期。 两点法不是什么终点法中的两点法,正确地说它应该属于动态法范畴,一种带标准的动态法. 新手上路，有哪位大侠能先容先容终点法中的两点法的原理，在生化上怎么往做两点法呀 （简单回答）最基本的生化反应方法有三种，其他的都是在此基础演变而来。 1。速率法，有叫动态法，仪器连续检测生化反应过程中的吸光度变化，目的是得到吸光度变化速率。酶活性的检测大多用此方法。检测底物的是下降反应，又叫负反应，例如：ALT AST 等；检测天生物的是上升反应，又叫正反应，ALP。 2。终点法。仪器检测生化反应某一时间点的吸光度值，目的得到反应溶液的具体吸光度值。常见的有GLU，TP ，ALB 等 3。两点法。仪器检测生化反应两个时间点的吸光度值，第二点减往第一点，得到吸光度的差值，检测底物的差值为负，检测天生物的差值为正，例如，中生试剂的肌酐项目Cr。 生化仪无论半自动或全自动，都有实验参数设置，只要按试剂说明正确设置，再照试剂说明做实验就行了。使用分光光度计另当别论。 两点法：又称为一级动力学法、固定时间法等，指在一定的反应时间内，反应速度与底物浓度的一次方成正比，即v=k[S]。由于底物在不断的消耗，因此整个反应速度在不断的减小，表现为吸光度的变化越来越小。这类反应达到平衡的时间很长，理论上可以在任意时间段进行监测，但由于血清成份复杂，反应刚启动时反应较复杂，杂反应较多，必须经过一段延迟时间才能进进稳定反应期。 两点法不是什么终点法中的两点法,正确地说它应该属于动态法范畴,一种带标准的动态法. 二、分析参数设置 分析仪的一些通用操作步骤如取样、冲洗、吸光度检测、数据处理等，其程序均已经固化在存储器里，用户不能修改。各种测定项目的分析参数（analysis paramete）大部分也已设计好，存于磁盘中，供用户使用；目前大多数生化分析仪为开放式，用户可以更改这些参数。生化分析仪一般另外留一些检测项目的空白通道，由用户自己设定分析参数。因此必须理解各参数的确切意义。 一、分析参数介绍 （一）必选分析参数 这类参数是分析仪检测的前提条件，没有这些参数无法进行检测。 1．试验名称 试验名称（test code）是指测定项目的标示符，常以项目的英文缩写来表示。 2．方法类型（也称反应模式） 方法类型（assay）有终点法、两点法、连续监测法等，根据被检物质的检测方法原理选择其中一种反应类型。 3．反应温度 一般有30、37可供选择，通常固定为37。 4．主波长 主波长（primary wavelength）是指定一个与被测物质反应产物的光吸收有关的波长。 5．次波长 次波长（secondary wavelength）是在使用双波长时，要指定一个与主 波长、干扰物质光吸收有关的波长。 6．反应方向 反应方向（response direction）有正向反应和负向反应两种，吸光度增加为正向反应，吸光度下降为负向反应。 7．样品量 样品量（sampling volum）一般是2μl～35μl，以0.1μl步进，个别分析仪最少能达到1.6μl。可设置常量、减量和增量。 8． 第一试剂量 第一试剂量（first regengt volum）一般是20～300μl，以1μl步进。 9． 第二试剂量 第二试剂量（second regengt volum）一般也是20～300μl，以1μl步进。 10．总反应容量 总