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发酵灭菌、染菌知识(理论篇)
发酵灭菌染菌理论培训 发酵灭菌篇 1.基础知识 2.发酵设备 发酵染菌篇 1.基础知识 2.染菌原因分析 3.案例分析 灭菌 生物化学工程是以活细胞或由细胞提取出来的酶为催化剂的反应过程 ,所以必须进行纯种培养 ,也就是只允许生产菌存在、生长和繁殖 ,不允许其他微生物共存。 1.1 培养基灭菌 培养基灭菌是指杀灭培养基中具有生活能力的细菌营养体及其孢子 ,工业规模上的液体培养基灭菌比除去杂菌更为常用 ,其中热灭菌最为简便、有效和经济。微生物受热被杀死 ,主要原因是高热能使蛋白质变性。 1.1.1分批灭菌 分批灭菌也称实罐灭菌 ,全过程包括升温、保温、降温3 个阶段 分批灭菌的温度随时间的变化过程取决于加热方式、换热面积的大传热系数的高低、换热介质的温度、培养基的质量因素。 热阻 死亡活化能(ΔE) 很明显,最不想死的是细菌孢子! 阿伦尼乌斯方程k=Ae-E/RT(式中A为指前因子;R为气体常数;T为热力学温度),以反应速率常数k表示的反应速率主要决定于反应活化能E,若催化使反应活化能降低ΔE,则反应速率即提高e-ΔE/RT倍。 试验证明 ,细菌孢子热死灭反应的ΔE很高 ,而有些有效成分热破坏反应的ΔE 较低,因而提高灭菌温度 T 会加快细菌孢子的死亡速率 ,从而缩短高温下的灭菌时间 ,由于其他有效成分的死亡活化能很低 ,温度提高只能稍微增大其热破坏程度 ,但灭菌时间显著缩短 ,其结果是有效成分的破坏量反而大为减少。 1.1.2 连续灭菌 连续灭菌的加热、保温和冷却 3 个阶段分别在不同的专有设备中进行。 板式热交换器连续灭菌装置的特点是单位体积的热交换器具有较高的传热面积 ,且可根据生产需要改变其换热面积的大小;蒸汽喷射连续灭菌装置的特点是加热、冷却极为短暂 ,缺点是培养基会被蒸汽的冷凝水稀释。下面是组合式 1.2 空气除菌 在发酵过程中 ,微生物的生长和繁殖需要大的氧气 ,这就需要输入大量的空气来提供氧气。气中的微生物多为细菌、细菌孢子 ,也有真菌、酵和病毒 ,其大小从几微米到几百微米不等 ,小的微生物附在空气中的灰尘上 ,灰尘的平均尺寸约为 0.1μm。粗滤器可将粗的微粒除去 ,0.5~2.0μm 的粒及细菌微生物由空气过滤器除去。 过滤器 1.2.1 空气除菌方法 (1)加热灭菌。 (2)辐射灭菌。波长226.5~328.7 nm的紫外 (3)化学灭菌。灭菌后续工作比较麻烦 (4)静电除尘。 还是设备问题,效果很好 (5)介质过滤。 也就是过滤器 1.2.2 空气除菌流程 2.1阀门的选用 发酵罐物料对输送阀门的要求甚严 ,既要保证运行时绝对不漏(否则将造成整批物料的染菌) ,同时又要承受定期蒸汽灭菌高温的影响。 常用阀门 截止阀 针形阀 旋塞阀 球形阀 手动隔膜阀 截止阀 也叫球心阀,截阀。优点:密封面摩擦力小,耐用;严密性能好,易于开关,维修方便;开启高度可以使用丝扣拉杆控制,易于调节流量;耐受高温及压力,不易损坏。缺点:截止阀阀芯阻力大,影响流量和流速;截止阀不易于在黏稠的物料中使用,这样回造成阀门的密封面不严密而泄漏;截止阀安装时有方向性,逆向安装会造成阻力更大,但在发酵罐的连接上,必须注意与发酵罐为正向,与管路流向为逆向安装。 针形阀 一般是用来控制微量调节的小型阀门,它的一般通径有15mm和10mm两种。 优点:耐受高温、高压、不易腐蚀;易于控制微量流速和流加、滴加补料;操作方便,易于更换。缺点:易于损坏,尤其是阀头容易掉头;因为结构小,通道小,所以容易被堵塞。 旋塞阀 也称考克,是一种不耐受高温和高压,但又易于操作的阀门。材质一般以铸铁为主,这就决定了它不能耐受高温(一般要求小于等于100 ℃)和高压,不能猛力开关,以免扭断、变形。 球形阀 也称球阀。特点:流体阻力小,流量大,极小有压差的表现;不受安装的方向性的制约;能耐受高温高压,耐腐蚀,严密性好,阀体本身不存在死角,结构简单,极少有渗漏点。缺点:不能做微量调节使用,最好是全开或全闭;尽管能耐受高温,也不要在长期高温管路上使用。 手动隔膜阀 也称隔阀,它是依靠橡胶隔膜和聚四氟隔膜,通过手动拉杆的紧密压合而达到开启和密闭的。特点:流体阻力小,流速不受影响;可以在黏稠或有颗粒的介质上;介质不会于阀头部分接触,因此不存在阀头填料密封处泄漏的弊端;结构简单耐受腐蚀。缺点:除特制的耐高温高压的隔膜阀外,一般的手动隔膜阀不耐受高温高压,一般公称压力在6Kgf/cm2 ,温度为80℃,最高耐受温度180℃;容易损坏,渗漏,变形;必须定期更换隔膜阀垫。 止回阀 又称止逆阀、单向阀等。止回阀是依靠液体本身的动力自动启闭阀门,它的作用是阻止介质的逆向流动。 特点:介质在阀体内单向流动,阻止介质倒流;耐受高温、高压
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