3-8高效液相色谱法应用举例.ppt

3-8 高效液相色谱法应用举例 3.8.1 正相键合相色谱法 3.8.2 反相键合相色谱法 3.8.3 反相离子对色谱 3.8.4 离子色谱法 3.8.5 空间排阻色谱法 3-8 高效液相色谱法应用举例 3.8.1 正相键合相色谱法 3.8.1.1 正相键合相色谱法测定柴油烃族组成 1 仪器 HP1050高效液相色谱仪; TFJ-Y100烃族分析仪; 9300型色谱工作站; 7125进样阀、7000六通切换阀; 氨基键合柱,Pherisorb NH2,5μm,4.6mm×200mm; 氰基柱,4.6mm×20mm。 2 试剂 正己烷 分析纯,活化后经硅胶脱芳烃、过滤、除气后使用; 二氯甲烷 经蒸馏、分子筛脱水、过滤、除气后使用。 3.氢火焰检测器(FID) 主要操作参数 催化炉温度350℃;氧化炉温度750℃;清洁炉温度800℃;喷雾压力0.04 MPa; H2流速45ml/min; N2流速17ml/min。 （1）采用液相色谱分离、移动丝氢火焰检测器分析柴油馏分(180-370℃)的饱和烃和烯烃总量、单环芳烃、双环芳烃、多环芳烃和胶质类组分的含量是可行的。该法具有简单、快速、准确、分析时间短等优点。 （2）通过方法的准确性和可靠性检验,饱和烃和芳烃在较宽的范围内均有良好的线性。 （3）移动丝氢火焰检测器与解决了不同油品响应因子不同的问题,提高了测定结果的准确性,是目前测定重馏分油最合适的检测器,但相对而言该检测器的操作较繁琐。 总之,该方法的建立对柴油加工工艺的优化及柴油产品的质量评价有着积极的作用,它也可作为柴油烃族组成基础数据的测定手段,为快速近红外光谱分析打下基础。 3.8.2 反相键合相色谱法 3.8.2.1 反相键合相色谱法测定水中荧蒽 1.仪器和试剂 (1)Agilent 1100高效液相色谱系统;四元泵;梯度阀;紫外可变波长检测器. (2)色谱柱:Zorbax Ecplipse XDB-C8柱,长150 mm,内径4.6 mm,粒度为5μm. (3)SPE固相萃取装置;SPE固相萃取小柱:填料为C18键合相500 mg,长6 cm;固相萃取抽滤装置. (4)荧蒽标准溶液:质量浓度为33μg/mL(国家标准物质研究中心提供). （5）荧蒽标准使用液:质量浓度为330μg/L,吸取荧蒽标准储备液1.0 mL于100 mL容量瓶中,用甲醇稀释并定容至刻度. （6）甲醇、二氯甲烷、异丙醇均为色谱纯;硫代硫酸钠;本实验用水均为二次蒸馏水 2. 结果与讨论 (1) 分别配制不同含量的荧蒽标准溶液, 按样品测定方法作校正分析, 得到不同的荧蒽峰面积, 以各组分的峰面积对浓度作图, 各点在试验范围内线性良好, 其线性回归方程为Area=0.038 182 5 Amount-0.333 916, 相关系数为0.999 9. (2)为了考察方法的精密度, 对几个浓度的样品进行了平行测定, 得到其相对标准偏差为0.98%~5.70%。 (3)最小检出浓度的测定: 在样品测定的色谱条件下, 待仪器稳定后, 记录空运行时的色谱图和数据, 打印信噪比报告, 按下式计算最小检出浓度: 取1 000 mL水样, 本法的最小检出浓度为15.84 ng/L. 3.8.2.2酰胺型反相键合色谱法用于碱性物质的分离 1 仪器与试剂 （1）仪器 HPLC色谱系统由日本岛津LC-10AD泵 SPD-10A多波长紫外分光检测器 Rheo-dyne7125进样阀 江申色谱工作站JS-3000 （2）试剂 Kromasil-5μm硅球(孔径10 nm,比表面积340 m2/g) 氨丙基三乙氧基硅烷(纯度99%,Fluka) 辛酰氯(纯度99%,Fluka) 甲醇(色谱纯,山东禹城化工厂) 水(二次蒸馏,0·45μm微孔膜过滤) 。 2. 酰胺型辛烷基键合固定相（AOBP）的制备 3.8.2.3 十四烷基胺键合固定相的反相色谱性能 3.8.3 反相离子对色谱 3.8.3.1 反相离子对色谱法测头孢他啶侧链酸含量 1 仪器和试剂 （1）仪器 岛津SPD-10AVP液相色谱仪; 紫外检测器; N2000色谱工作站; AS3120超声波振荡器; 0. 45μm过滤膜。 （2）试剂 乙睛; NaH2PO4 、NaOH; 溴化四丁基铵（反离子试剂）、聚氧化乙烯月桂醚； 对照品—头孢他啶侧链酸(市售工业品纯度97% )。 2 色谱条件 AlltechODS色谱柱, 250mm×4. 6mm。 流动相:溶液A与溶液B以5: 8的比例混合后, 用2mol·L-1 NaOH 溶液调节pH值至7. 0+0.1, 并过滤、脱气; 其中: 溶液A为0. 8g溴