砷铈催化分光光度测定法测定尿中碘方法探析.docVIP

砷铈催化分光光度测定法测定尿中碘方法探析碘是人体必需的元素。碘进入体内可随食物、饮水、食盐等途径摄取，其中90%由肾脏排出。尿碘可大致反应碘摄入量和血液中的含碘量，碘缺乏和碘过量都可导致一系列疾病。因此，探讨尿碘的分析方法对指导工业生产，为人群健康监护提供早期敏感指标有一定意义。实验室参照尿中碘的砷铈催化分光光度测定方法（WS/T107-2006）对测定尿中碘进行了研究，总结了影响实验结果的几个方面因素，使实验更易于操作和控制减少测定误差，结果较为满意 1材料与方法 1.1原理 采用过硫酸铵溶液在100 ℃条件下，消化尿样与标准， 利用碘对砷铈氧化还原反应的催化作用，H3AsO3 + 2Ce4+ +H2O → H3AsO4 + 2Ce3+ + 2H+ ，反应中黄色的Ce4+被还原成无色的Ce3+ ，碘含量越高，反应速度越快，所剩余的Ce4+则越少，控制反应温度和时间，于420 nm波长下测定体系中剩余Ce4+的吸光度值，求碘含量 1.2仪器 UV754N紫外可见分光光度计（上海精密科学仪器有限公司），DC-0515低温恒温槽（30±0.2℃），多孔电热消化器（孔间温度≤1℃），IKA旋涡混合器 1.3试剂 尿中碘的砷铈催化分光光度测定方法（WS/T107-2006）配套试剂盒（生产日期：110523 有效期至：111123 武汉众生生化技术有限公司） 1.4分析步骤 1.4.1尿碘标准系列（ug/L）：0、50、100、150、200、250、300 1.4.2测定 分别取0.25mL碘标准使用系列溶液及尿样（取样前需摇匀尿液，使所有沉淀物混悬；如果尿样的碘浓度超过标准曲线的点浓度范围，则作适当稀释后取样）各置于玻璃试管中，各管加入1mL过硫酸铵溶液，混匀后置于控温100℃的消化控温装置中，消化60min，取下冷却至室温后置于30℃恒温槽中。各管加入2.5mL亚砷酸溶液，充分混匀后放置15min，使其温度达到平衡；秒表计时，依顺序每管间隔相同时间（30s）向各管准确加入0.30mL硫酸铈铵溶液，立即混匀。待第一管（即标准系列中加300ug/L碘浓度管）反应时间29min时（吸光度值达到0.15~0.20之间），依顺序每管间隔同样时间（30s）于420nm波长下，用1cm比色杯，以水作参比，测定各管的吸光度值 1.4.3标准曲线绘制：以吸光度值为横坐标，以碘标准使用系列溶液的碘浓度为纵坐标，绘制标准曲线。标准曲线的碘浓度C与吸光度值A的回归方程为C=a+bLnA，计算标准曲线的回归方程，将样品管的吸光度值代入此方程，求出所测样品中碘浓度 1.4.4 校准结果： 标准曲线回归方程 C= -137.06Ln（A）+50.298相关系数R=0.9997详见表1 2结果 2.1检出限和最低检出浓度： 重复检测空白管（0管）吸光度值（n=12），测定数据见表1 2.2 精密度试验： 2.2.1 样品溶液：分别加入0.5、1.5、2.5mL碘标准溶液（10μg/mL）到100ml容量瓶（A级）中，用尿液混合液定容至100ml，此分别为样品溶液1（低浓度），样品溶液2（中浓度），样品溶液3（高浓度），每个浓度配制4个平行样 2.2.2 同测定标准系列操作步骤测定高中低三个浓度级别的样品溶液的浓度。结果见表2： 2.3 准确度试验 2.3.1 环境标准样品：编号GBW09108、GBW09110 ，定值日期2011年1月 ，有效期限2013年1月， GBW09108: 标准值73μg/L，不确定度9.0μg/L；GBW09110：标准值206μg/L，不确定度10μg/L按证书要求稀释后测定。结果如下； 2.3.2此次标准样品测试结果满意 3讨论 3.1实验室环境及器材 本法测定尿碘是微克及数据，因此环境中微量碘的污染都可能造成实验的失败。所以实验前应以0.5%的硫代硫酸钠溶液擦拭实验桌面，并对实验室墙面进行喷洒后开窗通风的方式除碘，减少实验污染。实验所用玻璃仪器用1:5的盐酸溶液浸泡12~24小时后，用自来水冲洗干净，并用蒸馏水润洗3遍，放置除碘实验室自然风干，切忌用烘箱烘干。每次实验前应测定多孔电热消化器的孔间温差（≤1℃），尽量不采用边缘消化孔，以减小孔间温差 3.2实验温度时间控制 样品100℃消化60min后，需取出冷却至室温再置于低温恒温槽中。加入硫酸铈铵溶液后应根据低温恒温槽中实际温度确定水浴时间。如夏天水浴温度超过30℃，则相应缩短水浴时间，效果较为理想。标准方法要求标准系列中300μg/L碘浓度管的吸光度值达到0.15～0.20时，于420 nm波长，以1 cm比色杯，用水做参比，测