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第24卷 第6期 光 谱 实 验 室 Vo1．2 4．NO．6 2 0 0 7年 1 1月 Chinese Journal of Spectroscopy Laboratory November，2007 芯片电泳手性分离研究进展 翁雪香① 陈建荣 (浙江师范大学化学与生命科学学院 浙江省金华市迎宾大道688号 321004) 摘 要 综述了基于芯片电泳技术的手性分离进展。分别介绍了这一领域的进样、检测技术，所采用 的手性选择剂，芯片制作材料及用于提高分离度的方法等，展望了手性分离在芯片电泳领域今后的发展方 向。 关键词 对映体，芯片电泳，手性分离。 中图分类号：0657．7 文献标识码：A 文章编号：1004．8138(2007)06—1122—06 1 前言 随着生物手性药物的需求越来越大，手性对映体的分离和光学纯度的确定引起人们的高度重 视。自上世纪9O年代以来，以高压直流电场为驱动力的毛细管电泳技术在手性分离领域已经发展 得较为成熟，已有多篇综述[1-7]对其进行过概括。 芯片电泳是在常规毛细管电泳的原理和技术的基础上发展起来的一种新型的微量分离装 置[8]。它是利用微加工技术在玻璃、石英、硅、塑料等基片上刻蚀出扁平的管道网络、反应器、检测单 元等的布局和结构，继而实现样品的进样、反应、分离和检测，它使毛细管电泳分离物质的整个过程 可以在一块几平方厘米的基质上得以实现L9 。所以和传统毛细管电泳相比，芯片电泳具有如下 优点n卜 ]：分析效率显著提高；试样和试剂消耗显著下降；分析装备微型化、集成化和自动化；能高 通量的分离分析多种样品等。 芯片电泳的问世为手性分离分析提供了全新的技术平台。近几年，基于芯片电泳的手性分离研 究也是倍受关注口 。。，很多手性药物小分子和氨基酸衍生物在数秒甚至是720ms内快速地实现了 分离，为高通量药物筛选奠定了基础。本文就目前这一领域采用的主要技术作一综述。 2 进样 要在较短的芯片通道实现手性分离，形成相对较窄的进样条带是关键。电泳芯片可以通过改变 进样通道的宽度及进样的电压而达到控制进样量的目的[3 。副。芯片电泳所用的进样方法大致可分 为三种：即简单进样法，夹流注入进样法和门进样法。其中，芯片电泳用于手性分离时用得较多的是 夹流注入进样法口 ，这种进样法既消除了进样时试样带的扩展，又避免了进样和分离时试样的泄 漏，提高了分离效率，降低了背景。但是，这种进样方法存在着电源装置复杂及进样时间长等问题。 3 检测 形成相对较窄的进样条带是成功实现基线分离的关键，而如此少量的进样同时也降低了检测 ①联系人．电话{(0579宅)；手机：(0E—mail：xuexian@zjnu．cn 作者简介：翁雪香(1976一)．女，浙江省衢州市人，讲师，博士，主要从事微流控芯片工作。 收稿日期：2007—09—12；接受日期：2007—09—24 第6期 翁雪香等：芯片电泳手性分离研究进展 信号，因而寻找到灵敏度高，适用性广的检测方法是芯片电泳的一项挑战。 3．1 激光诱导荧光检测法 手性芯片电泳用的最多的检测方法是激光诱导荧光检测法。该方法具有灵敏度高，响应速度快 及实验装置容易搭建等诸多优点。Hutt ，Wang[2 ，Rodriguez[223等人利用异硫氰酸荧光素(FITC) 作荧光标记实现了多种氨基酸衍生物的手性分离。Wallenborg[2妇等用4一氟一7一硝基苯并呋咱(4一 fluoro一7 nitrobenzofurazane)标记胺官能团分离了安非他明(amphetamine)及相关的药物分子。 但是，荧光检测法必须将待分离物质衍生化，这不但繁琐不便，而且还可能影响使用环糊精 (CD)这一类手性选择剂时的分离效率。当然如果检测物质本身能产生荧光 引，繁琐的荧光衍生化 就可省略了。 3．2 电化学检测法 电化学检测法是传统毛细管电泳及芯片电泳的另外一种较有吸引力的检测模式。这是因为它 无需衍生化，而且选择性较好。此外，电化学检测器的信号处理系统等外围设备比较简单，易于微型 化。 根据检测原理的不同，电化学检测法有三