补肾中药对肾阳虚动物模型影响的实验研究进展论文.docVIP

　　补肾中药对肾阳虚动物模型影响的实验研究进展论文 【摘要】 肾阳虚一直是中医研究的重点，并不断采用先进技术对肾阳虚证动物模型及其药物影响进行研究。近 50 年对肾阳虚证的研究认为，肾阳虚与神经内分泌系统（NEIS）有关。文章就肾阳虚动物模型在下丘脑-垂体-靶腺（肾上腺皮质、甲状腺、性腺和胸腺）轴不同环节、不同程度的功能紊乱，以及补肾中药对其影响的实验研究做了综述。 【关键词】 肾阳虚 动物模型 补肾中药 下丘脑 垂体 中医认为，肾为脏腑之本，十二经之根，先天之本在于肾。肾与命门本同一气，为人身阴阳消长之枢纽。因此.freelRNA的表达量明显比正常对照组减少［3］。以右归饮加减的补肾中药配方，采用RT-PCR半定量法检测下丘脑－垂体－肾上腺轴钙调素CaM mRNA的表达。结果：肾阳虚下丘脑、肾上腺CaM mRNA 水平升高，垂体CaM mRNA 水平无显著变化，而右归饮可降低下丘脑CaMmRNA 水平，但对肾上腺影响不明显，提示降低CaMmRNA 是其药物作用机理［4］。又以液体闪烁仪测定γ-32P-ATP蛋白激酶的活性。结果：肾阳虚大鼠下丘脑和肾上腺组织中钙调素蛋白激酶II（CaMPK-II）显著升高。右归饮对肾阳虚大鼠下丘脑和肾上腺组织升高的CaMPK-II活性有下调作用［5］。用32P-ATP掺入反应底物中的摩尔数表示蛋白激酶的活性，用放免法测定cAMP、cGMP含量，结果肾阳虚大鼠血浆中cAMP水平下降，cGMP升高，cAMP/cGMP比值降低，下丘脑组织中蛋白激酶PKA和PKC活性在胞液和胞膜中的活性较正常对照组明显降低。补肾药组血浆cAMP略升高，cGMP水平降低，cAMP/cGMP比值升高，且与模型组有统计学差异。补肾用药组下丘脑组织细胞中PKA活性升高，但与模型组无显著性差异，下丘脑组织胞液中PKC活性明显升高［6］。以免疫染色技术检测肾阳虚大鼠下丘脑－垂体－肾上腺轴c-Fos蛋白的表达。结果：肾阳虚大鼠下丘脑视交叉上核和肾上腺的c-Fos阳性细胞数显著升高，右归饮可抑制其升高，达到调整肾阳虚大鼠HPA轴的功能，抑制肾上腺细胞凋亡，从而改善肾阳虚症状［7］。利用扫描电镜分别观察下丘脑、垂体和肾上腺的超微结构，同时观察右归饮对其的影响。结果：肾阳虚大鼠模型组下丘脑正中隆起室管膜细胞界限不清，微绒毛分布改变，其顶端膨大呈球状，许多细胞部位出现孔洞，几乎未见分泌样颗粒结构，而补肾药组下丘脑正中隆起室管膜细胞排列整齐，细胞界限清楚，微绒毛粗细均匀，呈细长的绒线状，类似于正常组。由于下丘脑的许多神经分泌核团含有神经分泌颗粒的神经末梢终止于正中隆起，且正中隆起本身也有一些促垂体神经分泌细胞，因此正中隆起与下丘脑－垂体－肾上腺的分泌和调控密切相关［8］。电镜下模型组垂体ACTH细胞内质网扩张，线粒体空化，核形态正常,.freelRNA表达上调最为明显［12］。研究蛇床子补肾壮阳作用，用蛇床子香豆素（TCR）和蛇床子素给肾阳虚大鼠用药，并测定其血浆皮质酮（B）、促肾上腺皮质激素（ACTH）、肾素（PRA）、血管紧张素-II（AT-II）和醛固酮（ALD）浓度。结果：用药组大鼠血浆B和ACTH显著升高，但各组间PRA、AT-II和ALD浓度无显著性差异，提示TCR和蛇床子素具有保护和增强腺垂体－肾上腺皮质轴功能的作用［13］。 2 补肾中药对下丘脑－垂体－甲状腺轴的影响 甲状腺功能生理范围内或病理性降低是肾阳虚的主要病理之一，以甲基硫氧嘧啶造甲状腺功能低下的肾阳虚模型，显示胃黏膜有较明显的萎缩病变，胃体黏膜固有层厚度、胃体腺腺底相对厚度明显减少，胃体腺中性红染色增强，幽门黏膜核分裂相频数显著减少等［14］。研究金匮肾气丸对以氢化考的松所致动物模型，分为模型组、氢考＋补阳药组、氢考＋补阴药组、氢考＋金匮肾气丸组。结果：在给药7 d后，检测小鼠T3，T4水平，显示模型组T3，T4水平下降显著［15］，全匮肾气丸组可显著提高小鼠T3，T4水平，其可调节甲状腺轴的内分泌功能，而补阴药和补阳药对甲状腺轴有影响，虽二者无差异，但较肾气丸组的影响弱。观察参附注射液对甲状腺机能减退症（甲减）肾阳虚小鼠血清甲状腺素的影响，用他巴唑制备甲减肾阳虚模型，用放射免疫法测定小鼠血清T3，T4和促甲状腺素（TSH）浓度，结果模型小鼠血清T3，T4浓度均降低，TSH浓度升高，造模后用药组T3，T4浓度明显升高，TSH浓度降低，提示参附液可显著改善肾阳虚证候［16］。而以醋酸考的松造模15，23，30 d，其血中T3、T4浓度和TSH浓度明显低于正常组［17］。以电镜观察肾阳虚动物模型及补肾益气药影响的垂体、甲状腺组织的超微结构。结果：肾阳虚大鼠垂体促甲状腺激素（TSH）细胞、甲状腺滤泡上皮细胞出现内质网、高尔基体扩张、线粒体空化、细胞变形、核形