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微生物课件 7
绪 论 ? 第一章 原核微生物 第二章 真核微生物 第三章 非细胞微生物—病毒 第四章 微生物营养与培养基 第五章 微生物代谢和生长 第六章 微生物遗传和变异 第七章 微生物生态 第八章 微生物分类鉴定 微生物可利用的碳源 糖类: 葡萄糖,果糖,麦芽糖,蔗糖,淀粉,半乳糖,乳糖,甘露糖,纤维二糖,纤维素,半纤维素,甲壳素,木质素等 有机酸:乳酸,柠檬酸,延胡索酸,低级脂肪酸,高级脂肪酸,氨基酸等 醇类: 乙醇 脂类: 脂肪,磷脂 烃类: 天然气,石油,石油馏分,石蜡油 CO2 碳酸盐: NaHCO3, CaCO3, 白垩等 其他: 芳香族化合物,氰化物,蛋白质,肽,核酸等 细胞膜运送营养物质有4种方式: 单纯扩散(simple diffusion) 促进扩散 (facilitated diffusion) 主动运输 (active transport) 基团转移 (group translocation) 维持培养基pH的方法 使用磷酸缓冲剂: K2HPO4 / KH2PO4 采用“备用碱” CaCO3 、CaHCO3 氧化还原势又称氧化还原电位,是度量某还原系统中还原剂释放电子或氧化剂接受电子趋势的一种指标。单位为V或mV。 不同类型的微生物对氧化还原电位的要求不同 好氧微生物:较高0.3~0.4V 兼性厌氧微生物:0.1V 厌氧微生物: 0.1V以下,培养时要注意调节(驱走空气中的氧气,添加还原剂) 伊红美兰乳糖培养基(EMB) 伊红和美蓝两种苯胺染料可抑制G+和一些难培养的G-生长。 伊红为酸性染料,美蓝为碱性染料,试样中的多种肠道细菌在伊红美蓝培养基上形成能相互区分的菌落: 其中大肠杆菌能强烈发酵乳糖产生大量混合酸,菌体带H+,可与酸性染料伊红结合,美蓝再与伊红结合,使菌落在透射光下呈紫色,反射光下呈绿色金属光泽。 产酸力弱的沙雷氏等属细菌菌落为棕色; 不发酵乳糖不产酸的沙门氏等属细菌呈无色透明菌落。 特点: 消耗能量 有特异载体蛋白 可逆浓度运输 主要是无机离子、有机离子和一些糖类 三、主动运输 主动运输是广泛存在于微生物中的一种主要的物质运输方式。 四、基团移位 基团移位是另一种类型的主动运输,它与主动运输方式的不同之处在于它有一个复杂的运输系统来完成物质的运输,而物质在运输过程中发生化学变化。 其机制在E. coli中研究得较为清楚: 主要靠磷酸转移酶系统即磷酸烯醇式丙酮酸—己糖磷酸转移酶系统(PTS)进行。PTS 通常由五种蛋白质组成,包括酶I、酶II(包括a、b、c 3种亚基)和一种低相对分子量的热稳定蛋白质(HPr)。 主要存在于厌氧型和兼性厌氧型细菌中 主要用于各种糖类及脂肪酸、核苷、碱基等物质的运输 葡萄糖通过基团移位运输的步骤: 1)热稳定载体蛋白(HPr)的激活 PEP(磷酸烯醇式丙酮酸)+HPr 酶I 磷酸~HPr + 丙酮酸 2)糖经磷酸化进入细胞膜内 磷酸~HPr + 葡萄糖 酶II 6-磷酸葡萄糖+HPr 特点: 可逆浓度运输 消耗能量 需要载体 底物在运输过程发生化学变化 比较项目 单纯扩散 促进扩散 主动运输 基团移位 特异载体蛋白 无 有 有 有 运送速度 慢 快 快 快 溶质运送方向 由浓至稀 由浓至稀 由稀至浓 由稀至浓 平衡时内外浓度 内外相等 内外相等 内部高 内部高 运送分子 无特异性 特异性 特异性 特异性 能量消耗 不需要 需要 需要 需要 运送前后溶质分子 不变 不变 不变 改变 载体饱和效应 无 有 有 有 与溶质类似物 无竞争性 有竞争性 有竞争性 有竞争性 运送抑制剂 无 有 有 有 运送对象举例 水、O2 糖、SO42-氨基酸、乳糖 葡萄糖\嘌呤 四种运送营养方式的比较 p89 第一节 微生物的营养物质 第二节 微生物的营养类型 第三节 微生物对营养物质的吸收 第四节 培养基 任何培养基都应该具备微生物生长所需要六大营养要素: 任何培养基一旦配成,必须立即进行灭菌处理 碳源、氮源、无机盐、能源、生长因子、水 常规高压蒸汽灭菌: 1.05kg/cm2, 121.3℃ 15-30分钟;0.56kg/cm2,112.6℃15-30分钟 由人工配制的能够满足微生物生长、繁殖或积累代谢产物所用的营养基质。 培养基(medi
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