肌球蛋白轻链激酶调节对内皮素-1诱导大鼠肺动脉 - 第三军医大学学报.docVIP

肌球蛋白轻链激酶调节对内皮素-1诱导大鼠肺动脉平滑肌 细胞增殖及凋亡的影响 杨永曜，杨天和，蒋清安，杨龙，唐峰，谭洪文 （550002贵阳,贵州省人民医院心内科） [摘要]：目的 观察抑制肌球蛋白轻链（MLC）磷酸化的钙依赖途径肌球蛋白轻链激酶（MLCK）对内皮素-1诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞(pulmonary artery smooth muscle cells,PASMCs)增殖与凋亡失衡的影响。 方法 实验用细胞分成三组：对照组；内皮素-1刺激组(ET-1)；内皮素-1+肌球蛋白轻链激酶抑制组(ET-1＋M组)。干预72小时后，免疫印迹法测定细胞内MLCK表达水平；甘油凝胶电泳和免疫印迹法检测肌球蛋白轻链(MLC)的磷酸化水平，MTT比色法[3H]-TdR掺入法检测PASMCs的增殖情况，流式细胞仪检测PASMCs的细胞周期变化及凋亡率。 结果 同对照组比较，ET-1刺激后肺动脉平滑肌细胞MLCK蛋白表达显著增强（0.861±0.090 vs 0.315±0.040,P0.05），MLC磷酸化上调(P0.01)，增殖显著，凋亡率明显降低(P均0.05)；加入MLCK抑制剂干预后，MLCK表达（0.401±0.030 vs 0.861±0.090,P0.05）MLC去磷酸化显著增强，逆转ET-1对平滑肌增殖及凋亡的影响(P均0.05)。结论 MLC去磷酸化的钙依赖途径能显著逆