食管癌相关纤维细胞对食管癌放疗敏感性的影响及其作用机制研究.docVIP

报告正文 1. 申请人简历 姓名：研究工作经历 2. 立项依据与研究内容 （1）项目的立项依据。 食管癌是我国常见的恶性肿瘤，每年新诊断25万新发病例，占全世界1/2，死亡率17.38/10万，占全部恶性肿瘤死亡的16.05％，居第四位。食管癌临床确诊时约70%-80%的患者已丧失手术机会，放疗成为局部晚期食管癌的主要治疗手段。单一放疗的疗效有限，2年存活率仅10%左右。目前标准的同步放化疗的5年生存率也仅在20%左右，而50%以上的病例治疗后出现局部复发[1,2]。如何提高食管癌治疗效果是临床需要解决的棘手问题。研究发现食管癌治疗过程中表现出的获得性放疗抵抗性是阻碍食管癌放疗效果进一步提高的重要因素。因此，深入研究食管癌获得性放疗抵抗性的形成机制，寻找临床可干预的新靶点，设计相应的治疗策略加以逆转，是能否进一步提高食管癌放疗效果的关键。 食管癌放疗抵抗分子机制研究现状 课题组前期通过梯度剂量照射法及单克隆筛选法成功建立了人食管鳞癌放疗抵抗细胞株KYSE-150R，其D0、Dq与其母株KYSE-150相比有显著提高，提示KYSE-150R细胞株获得了明显的放疗抵抗性。我们进一步的研究发现采用EGFR特异性抗体西妥昔单抗可以在一定程度上逆转KYSE-150R细胞株的放疗抵抗性[3-4]。此外，其他研究人员发现下调Bmi-1表达同样可以缓解KYSE-150R细胞株的放疗抵抗性[5]。上述这些及近年来报道的针对食管癌放疗抵抗性的分子机制研究都是着眼于食管癌细胞本身，而未关注肿瘤微环境对食管癌放疗敏感性的影响[6-9]。近年来，越来越多的研究证实，肿瘤微环境对于肿瘤的治疗敏感性亦起着至关重要的作用，有效的联合治疗策略总是同时针对肿瘤和其宿主微环境两个重要因素[10-11]。肿瘤微环境主要由纤维细胞、内皮细胞、免疫细胞、基质膜等构成，是肿瘤细胞的保护伞，可通过调节肿瘤细胞与其微环境之间的相互作用或肿瘤细胞之间的相互作用来介导肿瘤细胞的治疗抵抗、转移侵袭等恶性增殖能力[12-13]。 肿瘤相关纤维细胞对肿瘤放疗敏感性的重要影响 肿瘤相关纤维细胞 (cancer associated fibroblasts, CAFs) 作为肿瘤微环境发挥其对癌细胞影响作用的主要执行者，可通过激活自分泌或旁分泌信号通路调控肿瘤细胞的DNA损伤修复响应、促结缔组织增生反应等，从而诱导肿瘤组织产生放疗抵抗性[14]。如肿瘤相关纤维细胞在放射线的刺激下可分泌转化生长因子beta (TGF-beta)。而TGF-beta可与其癌细胞表面的受体结合启动下游的信号通路，导致细胞内识别DNA损伤的ATM激酶活性上调，从而启动细胞内DNA损伤修复响应，增加肿瘤细胞的抗凋亡能力[15]。研究证实采用TGF-beta受体的抑制剂LY364947阻断TGF-beta介导的细胞内抗凋亡信号通路可使胶质瘤细胞株的放疗敏感性增加25%。体内实验亦表明采用TGF-beta的特异性抗体可使放疗后的肿瘤生长延迟时间显著延长[16]。此外，有研究表明肿瘤相关纤维细胞亦介导了前列腺癌、乳腺癌的放疗抵抗性。如前列癌纤维细胞在放射性或药物的刺激下可分泌WNT16B，而WNT16B可与其癌细胞表明的受体结合并启动癌细胞内的Wnt/β-catenin抗凋亡信号通路，从而介导了前列癌获得性放疗抵抗性的形成[17]。而肿瘤相关纤维细胞在乳腺癌的放疗反应中亦发挥了重要作用。研究发现低剂量的放射线可导致乳腺癌纤维细胞发生早衰，而早衰的乳腺癌纤维细胞可导致乳腺癌细胞增殖加快，放疗敏感性下降[18]。 肿瘤相关纤维细胞除了能分泌多种细胞因子来激活肿瘤细胞内的抗凋亡信号通路导致肿瘤放化疗抵抗性的产生，它还能为肿瘤细胞的生长提供生物力学上的支持。例如鳞状细胞癌（SCC）为保持其侵袭力，需要其宿主微环境里的纤维细胞不断加入补充。3D共培养试验研究发现，CAFs总是作为开路先锋，与SCC细胞一起侵犯胶原蛋白层，促进SCC细胞的转移侵袭[19]。有研究发现肿瘤复发灶、转移灶与其原发灶相比，放疗敏感性显著下降。因此，我们推测CAFs除了可通过分泌多种细胞因子激活肿瘤细胞内的抗凋亡信号通路还可通过促进肿瘤细胞的转移侵袭能力来介导肿瘤放疗抵抗性的产生。因此，CAFs作为肿瘤放疗抵抗性的直接介导者，应对其进行深入的研究，开发其肿瘤干预能力，提高肿瘤治疗的敏感性及特异性，使现阶段肿瘤治疗的诸多瓶颈问题能有所突破。近年来，CAF在肿瘤进展中发挥的巨大作用已日渐清晰抑制CAFs的活性将成为未来肿瘤靶向治疗的一个新前景。 食管癌相关纤维细胞的研究进展及本课题组的研究发现 研究显示食管癌相关纤维细胞与正常食管纤维细胞相比，可分泌多种与细胞增殖、血管发生、细胞粘附性、运动性、转移侵袭能力相关的因子，如FGF18、IL8、MMP10、CLDN1