牛尾菜根乙醇提取液药理活性的初步研究.docVIP

牛尾菜根乙醇提取液药理活性的初步研究 　　摘 要：目的：对牛尾菜根提取液的祛痰镇咳、消炎镇痛作用进行初步研究.方法：用牛尾菜根乙醇提取液对小鼠连续灌胃7d，分别采用氨水引咳法、酚红排泌量法、足肿胀和耳廓肿胀法、醋酸扭体法和热板法观察效果.结果：牛尾菜根的乙醇提取液可明显抑制氨水所致的小鼠咳嗽，使酚红排泌量增加，明显对抗热刺激和醋酸所致的小鼠疼痛反应.结论：牛尾菜根的乙醇提取液对小鼠有明显的镇咳祛痰及消炎镇痛作用. 关键词：牛尾菜根；镇咳；祛痰；消炎；镇痛 基金项目：吉林省科技发展计划（编号：20140204002NY）；吉林省大学生创新创业训练计划（编号：2015033）. 牛尾菜（Smilax ripariaA. DC）又叫心叶牛尾菜、龙须菜、鞭杆子菜等，是百合科菝葜属的多年生宿根植物.其幼苗可食用，口感好，无异味，牛尾菜还具有广泛的生物活性和极高的药用价值，有活血化瘀、祛痰止咳等功效，多用于治疗风湿性关节炎、支气管炎、肺结核、咳嗽咯血等[1-2]，是长白山区广受欢迎的一种药食的重要植物资源[3-4]，也是我国山野菜出口的重要品种之一[5]， 目前对牛尾菜的研究主要集中在其营养、成分、栽培、种苗发育等方面，很少有牛尾菜药理活性方面的研究报道，未见有祛痰镇咳、消炎镇痛方面的相关实 验数据.为探讨其药理活性，本实验对牛尾菜根进行提取，观察其对小鼠的祛痰镇咳、消炎镇痛作用. 1 实验材料 1.1 动物 体重为（25±2）g的昆明小鼠，购自长春市高新区医学实验动物中心（scxk-（吉）2008-0001）.小鼠灌胃给药，给药剂量0.02L/kg体重，1次/d，连续7d. 1.2 药品及处理 牛尾菜采集于吉林省通化县金斗乡，清洗干净后放在通风良好的地方自然干燥，取根部用粉碎机粉碎.称取牛尾菜根粉末400g，以70%乙醇加热回流提取2小时，重复3次，得到乙醇提取液，浓缩后配成高、中、低剂量组（生药含量每毫升0.202g、0.101g、0.0505g），4℃冷藏备用. 1.3 试剂与仪器 枸橼酸喷托维林片，国药准字丹东制药有限责任公司生产；阿司匹林缓释片，批号120707056，哈尔滨格拉雷药业有限公司生产；地塞米松磷酸钠注射液，国药准字焦作福瑞堂制药有限公司. RE-5ⅡAA型旋转蒸发仪，上海亚荣仪器厂；SHZ-D（Ⅲ）型循环水式多用真空泵，河南省予华仪器有限公司；UV1200S型紫外可见分光光度计，上海翱艺仪器有限公司；FW-100高速万能粉碎机，北京中兴伟业仪器有限公司；YLS-8A型多功能诱咳引喘仪，济南益延科技发展有限公司；YLS―21A型冷热板测痛仪，济南益延科技发展有限公司. 2 实验方法 2.1 小鼠氨水引咳法 最后一次给药1h后，在多功能诱咳引喘仪内自动恒压喷放氨雾30s，将小鼠放入其内记录咳嗽潜伏期和3min内咳嗽的次数. 2.2 小鼠酚红祛痰法 制作标准曲线，得回归方程为：y=0.1195x-0.16，R=0.77.末次给药后30min，每只小鼠腹腔注射浓度为0.5%的酚红溶液0.5ml，30min后处死小鼠，仰卧位固定，用手术刀剥离气管周围的组织，取等长的气管，放入离心管中加5ml的5%碳酸氢钠溶液，每分钟3000转，离心5分钟后吸取上清液，在波长546nm处测吸光度值带入回归方程，即得小鼠酚红的排泌量，以此作为祛痰作用的指标. 2.3 二甲苯致小鼠耳廓肿胀实验 末次给药1h后，左侧耳廓双面均匀涂抹0.04ml二甲苯，右耳廓作为阴性对照组同法涂抹等量生理盐水，1h后处死小鼠，沿耳廓基线对称剪下两耳称重，计算肿胀度（mg）及肿胀抑制率（%）. 2.4 甲醛致小鼠足肿胀实验 末次给药1h后，在左足跖部注射0.05ml 2.5%甲醛，右足为阴性对照，同法注射等量生理盐水，1h后处死小鼠，对称剪下小鼠左右足，称重，计算肿胀度（mg）及肿胀抑制率（%）. 2.5 醋酸扭体法实验 末次给药1h后，腹腔注射0.6%醋酸溶液（0.2ml/10g），记录痛阈潜伏期及注射醋酸后15min内扭体的次数，计算抑制率. 2.6 热板法实验 把冷热板测痛仪调到55℃，分别记录每只小鼠的痛阈潜伏期和痛阈值，计算痛阈提高百分率. 2.7 统计分析 表1、表2及表5、表6用spss19.0软件处理，进行单因素方差分析，结果用±s表示. 3 结果与分析 3.1 牛尾菜根乙醇提取液的镇咳实验 表1显示：与生理盐水组和阳性对照组相比较，中剂量组和高剂量组都能显著延长小鼠的咳嗽潜伏期（P 　　3.5 热板法实验 实验结果显示：