OXYGRAPH氧电极使用方法剖析.ppt

3.重新启动转子，这时记录信号上升，因为在转子的搅拌下，反应杯中的水又重新达到了平衡。记录信号应该稳定在关闭磁转子之前的水平。如果磁转子稳定在一个中间水平，说明转子的转速不够，应该增加转子的转速。如果在测试过程中电极没有反应，很可能是在电极的准备过程中有问题，或者电极与控制盒的连接有问题。 六. 样品测定 （1）样品测定 在测定前，应该先将盛有样品的烧杯放在与测定温度相同的水浴中适应一段时间，然后把样品液加入到反应杯中，放入转子，在工具栏中点击 ，启动转子并调节转子的转速，搅动测定溶液，当温度恒定后，点击 开始记录测定信号，即可得到一条放氧速率或耗氧速率的踪迹曲线。点击 停止记录，测定完毕。 （2）样品放/耗氧速率的计算 ① 根据试验要求选取一段斜率比较稳定的记录结果计算斜率。点击工具栏的 图标计算速率。在横坐标（时间轴）下方显示出两个黑色的▲标记，用鼠标的左键拖住左边的▲标记，左右移动▲标记选取参与计算的曲线位置，拖住右边的▲标记，左右移动确定参与计算曲线的时间区间。 选取参与计算的时间段后，点击鼠标右键，显示以下窗口： 选中“Add Rate To Table”，显示 “Add Rate To Table? ”对话框 点击“Add”，所选择时间段氧的变化速率被添加到变化速率表（Rates of Change Table）。 点击“Normalize factor”，显示“Dialog”窗口 在“Dialog”窗口中输入相应的校正因子（样品重量或面积及反应杯中样品液的体积），便可将氧的变化速率单位自动换算成标准的光合速率或呼吸速率单位。 蓝色框内的数据为输入校正因子后计算出的光合/呼吸速率 七. 注意事项 1.进行电极的校正时，一定要盖上反应杯的盖子，特别是做无氧线时更应当注意。 2.转子的转速影响到信号线的稳定性，对于不同的测定条件应当根据信号线是否平稳调节转子的转速。 3.测定切碎的组织时，组织的碎块不宜过大，并且碎块大小要尽量均匀一致，否则信号线不稳定。 4.氧电极对温度变化非常敏感，测定时需维持温度恒定。如果反应杯中出现气泡，则表明溶液尚未与测试条件下的环境温度达到平衡。 5.反应杯中不应有气泡，否则会造成信号不稳，有经常性的随机干扰，使记录线扭曲。因为气泡中的含氧量比水中高20多倍，反应杯中有气泡时溶液中的氧就会扩散到气泡或气泡中的氧扩散到溶液中，结果会造成电极反应迟纯。空白测定时，信号会出现缓慢漂移。 6.电极使用一段时间后，在阳极（银极）上会形成一层氧化膜，使电极的灵敏度下降，需要用清洁剂清洁阳极。清洁电极时，用棉棒蘸少许清洁剂，于银极上来回擦拭，直到银极洁亮为止，然后用蒸馏水冲洗干净。 注意：清洁电极时一定不要用锋利的器具划伤电极。 7.操作过程中必须注意实验中空气组成的变化和干扰气体（H2S、SO2、CO2等）的影响，以及气压的变化和温度的突变。测定前还应注意洗净反应杯，以消除遗留在反应杯中的霉菌或细菌的影响。 8.由于反应杯中的溶液体积要参与耗/放氧速率的计算，因此每次测定时一定要准确加入定量的液体，如果要在液体中加入固体样品，加入样品后，调节电极室上的旋钮，使溶液刚好进入旋钮中的小孔中，使反应杯中无气泡。不可将旋钮旋得过深使反应杯中的溶液从小孔中溢出而影响测定液的体积。 9.用注射器向反应杯中加溶液（小样品、抑制剂或激活剂）时，应注意针头和注射器中的样品溶液无气泡。使用的注射器针头不要过长，以免损坏电极膜。 10.由于磁转子比较小，清洗反应杯时，注意不要将磁转子倒掉。 未加抑制剂前 加抑制剂后 未加抑制剂前 加抑制剂后 未加亚油酸钠前 加亚油酸钠后 LOX酶活性测定 LOX酶活性测定 未加亚油酸钠前 加亚油酸钠后 Oxygraph 液相氧电极使用方法 ? 一、氧电极的基本配置 二、氧电极的准备 三、氧电极测定系统的安装 四、氧电极的校正 五、氧电极敏感性的测试 六、样品的测定 七、注意事项 液相氧电极的使用方法 一. 氧电极的基本配置 OXYG1 氧电极控制盒 氧电极控制盒背面 电源插口 电极连接线插口 与计算机通讯的RS232连接口 磁力搅拌器 保险丝 A2 装膜器 S2/P 磁转子 S7A O型圈 S3 反应杯 电极 氧电极的基本配件 DW1 Electrode unit 氧电极反应室 电极与控制盒连线 A3 S4 S16 盐桥纸 S16－电极清洁剂 S4－电极膜 A3－反应室安装工具 氧电极的基本配件 二. 氧电极的准备 1.清洁电极