耐酸性α-淀粉酶产生菌的筛选及其产酶条件优化.pdfVIP

中国饲料 2016年第 17期 DOI：10．15906／j．cnki．cnl1—2975／s 耐酸性 一淀粉酶产生菌的筛选 及其产酶条件优化 任世英 ’，邵 奎 ’，李 雯 ’，张 威 ’，刘 飞 (1．淮阴_T学院生命科学与食 品1二程学院，江苏淮安 223003；2．淮 阴工学院化学T程学院，江苏淮安 223003) f摘要】为 了分离得到饲料用耐酸性 ol一淀粉酶的菌株 ，从食堂排污 口取土样 ，筛选到一株耐酸(pH=4)且产 一淀 粉酶的菌株，并对其形态特征、培养特征、生理生化特征、酶学性质及产酶条件进行研究。结果表明：茵体呈杆状．革 兰氏染色阳性 ，胞 内形成异染粒和 PHB，接触酶 、淀粉水解、卵磷脂酶试验呈 阳性 ，反硝化试验 、荧光色素呈 阴性。根 据菌体形态、菌落特征及部分生理生化特性 ．将其初步鉴定为芽孢杆菌属 ，即Bacillussp．SD一1。通过单 因素试验对菌 株的最适产酶温度及pH进行优化 ，培养温度为43℃，pH 为4．5，发酵60h，酸性 仅～淀粉酶活力达到 74．6U／mL。 关『键词]耐酸性 ；a--淀粉酶产生菌；芽孢杆菌属 [中图分类号】$816．6 [文献标识码】A [文章编号】1004—3314(2016)17—0010-03 [Abstract]InordertoobtainacidresistantstrainsproducingOL-amylasefortheapplicationinfeedindustrialfield． ClearcirclewasusedtoinitiallyscreendesiredstrainsatpH 4．SD一1waschosenasexperimentalstrainowningtoitshigh． erratio ofdissolvingcirclediametertocolonydiameter．Strain SD一1wasrod．G ．Testresultsofmetachromaticgranule staining，PHB，catalase，amylolysis，lecithinasewerepositive．Testresultsofdenitrification andfluorchromewerenegative． Accordingtoitscellandcolonymorphology，physiologicalandbiochemicalproperties，strainSD-1belongstogenusBacil— lus．namelyBacillussp．SD一1．Optimizationofhigherc~-amylaseproductionconditions：43℃ ，pH 4．5，fermentationfor60h， theactivityofO．／一amylasewasupto74．6U／mL． [Keywords]acidresistant；bacterium-producing0一【amylase；Bacillus 酸性 一淀粉酶是指可在酸性条件下水解淀粉 甚至失去活性 (吴茜茜 ，2012；李勃 ，2009)。随着我 的酶 ．在低pH值条件下以随机方式切断淀粉分子 国淀粉质原料深加工工业的发展 ，工艺条件的不断 内的仅一1．4糖苷键 ，水解产物为低聚糖 、麦芽糖和 改变．一些淀粉原料深加工工艺需要在较低的pH 糊精等(潘涛，2010；贺胜英等，2010)。酸性 Ot一淀粉 条件下进行 所以．开发新型耐酸性 一淀粉酶迫在 酶广泛应用于酸性条件下淀粉原料的加工，如高麦 眉睫(魏姗姗 ，2014；石方方 ，2012)。 芽糖浆的制备、发酵饮料和青贮饲料的生产、工业 自从 1963年 日本学者 YasujiMinoda发现黑 副产品的加工以及废料的处理等 (谢建华等 ，2011； 曲霉可以产生耐酸性 仅一淀粉酶后 ，人