湖北宜都斑点叉尾鮰微卫星遗传多样性分析.pdfVIP

第26卷第6期 华 中 农 业 大 学 学 报 Vo1．26 No．6 2007年 12月 Journal of Huazhong Agricultural University Dec．2007，831～835 湖北宜都斑点叉尾鲴微卫星遗传多样性分析 梁宏伟 邹桂伟h 罗相忠 汪登强 。 (”农业部淡水鱼类种质资源与生物技术重点开放实验室／中I$t水产科学研究院长江水产研究所，荆州434000； 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心，无锡214081； 华中农业大学水产学院，武汉430070) 摘要 以湖北省宜都市的斑点叉尾婀为研究对象，利用8个微卫星位点|pCGO033、IpCG0035、DCGOo4o、 IpCG0041、IpCG0043、IpCG0051、IpCGO054、IpCGOO57的引物进行了遗传分析，统计分析了等位基因数、杂合度、 平均多态信息含量等遗传参数，并检测了群体符合Hardy-Weinberg平衡的状况。结果显示：8个微卫星标记位 点在群体中共检测到47个等位基因，观测等位基因数在3～8个，平均有效等位基因数为4．254 8个，群体观测 杂合度为0．787 3，期望杂合度为0．728 2，平均多态信息含量(PIC)为0．692 0，达到高度多态(PICO．5)，8个 位点中有4个(IpCG0O33、IpCG0041、IpCG0054、IpCG0057)处于Hardy-Weinberg平衡状态(PO．05)，另外4 个处于不平衡状态(PO．05)。结果表明我国湖北省宜都市养殖的斑点叉尾鲴目前仍具有较高的遗传多样性， 遗传信息丰富，遗传变异大，可以作为良好的育种材料。 关键词 斑点叉尾婀；微卫星；遗传多样性 中图法分类号 Q 959．46 文献标识码 A 文章编号 1000-2421(2007)06—0831—05 斑点叉尾鲴是原产于美国密西西比河谷和墨西 尾鳍条，--20℃无水乙醇保存。 哥海湾的一种重要经济鱼类，具有肉嫩味美、适温范 1．2 基因组DNA的提取 围广、生长速度快、抗病能力强、饲料转化率高等特 参考文献[3]，用苯酚一氯仿抽提法从尾鳍条进 点，一直以来都是美国淡水养殖的主导品种。我国 行基因组DNA提取，并用0．8％的琼脂糖凝胶电泳 自1984年引入以来，已在全国2O多个省份推广养 检测。 殖，成为我国淡水养殖的重要品种。近年来，刘占江 1．3 PCR扩增引物 等调查发现疾病问题已经成为制约美国斑点叉尾鲴 根据文献报道的微卫星引物序列 ]，由上海生 产业发展的瓶颈，另外生长性状、饲料转化率、胴体 工生物工程技术服务有限公司合成8对引物，微卫 品质和肉片产量、对低溶氧的耐受性、繁殖成功率以 星引物序列及筛选后的退火温度见表1。 及收获量等都制约了其产业化发展l_1]。而在我国， 1．4 PCR反应体系与扩增程序 斑点叉尾鲴属于引进品种，经过连续多代的人工繁 反应体系总体积为 15 I ，其中IO×Buffer 殖，斑点叉尾鲴的养殖性状有所退化，主要表现为抗 1．5 L，lO mmol／I dNTPs 0．2 L，5 U／ I Taq 病力下降、生长缓慢和规格变小，高密度集约化养殖 DNA聚合酶0．2 L，lO~mol／I 的上下游引物各 时易发生大规模病害和死亡，其根本原因是亲本群 0．5 L，DNA模板0．2 I ，灭菌ddH2O 11．9 I 。 体数量小，更新周期长和近亲繁殖所致l_2]。笔者对 PCR扩增程序为94．0℃预变性5 min，然后34个 目前在我国养殖的斑点叉尾蛔遗传多样性进行了分 循环，每个循环94．0℃变性30 S，48．O～53．0℃退 析，旨在为斑点叉尾鲴的选育和利用提供借鉴。 火30 S，72．0℃延伸1 min，循环结束后72．0℃延伸 lO min，4℃保存。 1 材料与方法 1 5 PCR产物的电泳检测和基因型的