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实时荧光定量PCR的一些操作技巧
10 5 Vol. 10 No. 5
第 卷 第 期 实验科学与技术
2012 10 Experiment Science and Technology Oct. 2012
年 月
· ·
实 验 技 术
实时荧光定量PCR 的一些操作技巧
万 谦 ,陆 华
( ; , 61004 1)
成都中医药大学 第二临床医学院 第二附属医院 成都
: : PCR( Qpcr) , , , SYBR Green I
摘要 背景 实时荧光定量 由于方法上的优势逐渐普及 受到使用者的欢迎 但是 最常用的 法
Qpcr 、 、 。 : SYBR Green I
在使用中存在着由于不当操作而数据精度 不 高 重复性差 可信度的缺点 目的 向读 者介绍提高 法
Qpcr 数据精度 、重复性和可信度的操作技巧 。方法: 笔者根据实 际工作中的经验详细说明一些有助于提高 实验质量的操作
技巧 。结论: 在 SYBR Green I 法 Qpcr 过程 中注重操作技巧 能大幅改善实验质量 。
: PCR; ;
关 键 词 实时荧光定量 引物扩增效率 数据精度
中图分类号:R331 ;TP399 文献标志码:B doi :10 . 3969 /j . issn. 1672 - 4550 . 2012 . 05 . 064
Some Operation Tactics in Real-time Quantitative PCR
WAN Qian ,LU Hua
(Second Clinical Medical School / Second Affiliated Hospital ,Chengdu University of
Traditional Chinese Medicine ,Chengdu 61004 1,China)
Abstract :Real-time quantitative PCR (Qpcr)is becoming popular because of its advantages ,but the most popular Qpcr method-Qpcr
with SYBR Green I dye staining has the drawbacks of low data precision ,low data repeatability and low credibility because of improper
operations. This paper introduces the operation tactics to improve the data precision ,repeatability and creditability of Qpcr with SYBR
Green I dye staining. One introduces the detailed operation tactics based on the authors ’operation experience. The experiment quality
can be greatly improved through
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