柑酵素的抗氧化分析平台.PDF

柑酵素的抗氧化分析平台 抗氧化能力評估 人體在正常代謝過程中會產生自由基(Free Radical)及活性氧(Reactive Oxygen Species) ，例 如粒腺體是細胞內進行氧化作用產生能量的主要場所，因此也是產生自由基及過氧化物的主 要胞器。自由基是能獨立存在而具有不配對電子的原子、離子或分子 ，分子量較大的自由基通 常並不活躍，但小的自由基則相當活潑，具有搶奪其它物質電子的特性 ；活性氧是氧的衍生物， 最常見的有超氧自由基O －(superoxide anion radical) 、過氧化氫H O (hydrogen peroxide) 、氫氧 2 2 2 自由基 OH(hydroxyl radical )、過氧化脂質LOOH(lipid hydroperoxide) 、一氧化氮NO (nitric oxide) 、 1 單線態氧 （singlet oxygen, O ），這些活性氧分子也大都是自由基。它們的共同特性是極為活 2 潑不安定 ，具有向鄰近的分子奪取電子的活性，使得被奪電子的分子氧化，形成另一個新的自 由基，引發出一連串的連鎖氧化反應。雖然這些分子在人體內也具有一些功能，例如 病毒、細 菌感染時白血球釋放的自由基可以 攻擊消滅病源體、一氧化氮(NO)具有促進人體某些生理活 性的功能，但當人體內這些分子過量，或人體抗氧化系統變弱時，這些分子會使細胞內維生素、 荷爾蒙、酵素、核酸、抗體等生物分子氧化 ，使組織細胞失去正常功能、破壞DNA引起 基因損 傷或突變 ，導致人體加速老化及產生文明病、慢性病、癌症等疾病。人體內自由基與活性氧的 來源除了正常代謝過程中會產生外，許多是內外在因子的刺激所致，包括：不良情緒壓力過( 大、緊張、急躁、焦慮、鬱悶) 、生活習性(抽菸、飲酒過度) 、飲食(油炸食品 、食品添加物、 農藥 殘留蔬果) 、環境因子(紫外線、電磁波、輻射線、空氣污染、水污染) 。 抗氧化劑是指任何可以去除自由基、抑制自由基的作用、或終止氧化連鎖反應的物質。人 體在 正常生理狀況下，自由基在身體中維持動態平衡狀態，不會對身體造成傷害。因為人體中 有多種酵素及營養素分子 能有效抑制或減緩自由基或自由基所產生之氧化鏈鎖反應之物質，， 建構起人體的保護網。在酵素系統方面最常見的有超氧歧化酶(superoxide dismutase,SOD) 、過 氧化氫酶 （catalase, CAT ）、穀胱甘肽過氧化酶（glutathione peroxidase, GSH-Px ）等，先由SOD 將超氧自由基轉化為過氧化氫，再由CAT及GSH-Px轉化成對人體無害的氧及水 。另外在營養 素有機分子方面最普遍的有類胡蘿蔔素（β-carotene ）、維生素C 、維生素E 、穀胱甘肽（glutathione, GSH ）及輔酶Q10 等，也以不同的機制幫助我們清除多餘的自由基 。例如類胡蘿蔔素能透過提 供電子抑制活性氧的生成，達到清除自由基的目的、維生素C可提供自身的氫給自由基形成穩 定的分子、維生素E可中和過氧化自由基，結束自由基鏈鎖反應，有效地抑制脂類過氧化作用 、 GSH可以在 GSH-Px的幫助下使許多體內的過氧化有機分子還原 、有些有機分子可與具有促氧 化能力的金屬例如鐵或銅離子( )產生螯合作用，以減少金屬離子參與的氧化連鎖反應。因為人 體內自由基過度累積時，就會使身體正常機能受到傷害並導致疾病。因此可以藉由強化身體本 身的酵素系統與補充更多清除自由基的營養素，來使身體中的自由基維持平衡。 本計畫根據以上自由基與活性氧的生理特性與抗氧化劑之作用機制原理，在評估新會柑 酵素或新會陳皮酵素之抗氧化能力，將進行以下四項活性檢測。 (1)清除 DPPH自由基能力檢測 DPPH （1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl radical 2,2-Diphenyl-1- （2,4,6- trinitro- phenyl ）hydrazyl ） 是 以氮 為中心的自由基，會捕獲 其他自由基的電子，產生氧化連鎖反應 。而抗氧化劑在清除 DPPH時會提供氫給 DPPH自由基，而達到抑制氧化連鎖反應的進行。 DPPH溶於甲醇溶液中 呈現深紫色，由於 DPPH自由基在 517nm時有較