生物技术之基因工程载体（vector）.PPT

基因工程发展史有关的重要事件 第二节 基因工程的工具酶 定义：凡在基因工程中应用的酶统称为工具酶。 一、限制酶 (restrict enzymes) （一）限制与修饰现象 大多数的细菌对于噬菌体的感染都存在一些功能性障碍，即所谓的寄主控制的限制(restriction)和修饰(modification)现象，简称R/M体系。 作用：一是保护自身的DNA不受限制，而是破坏外源DNA使之迅速降解。 （二）限制酶的命名和分类 定义：凡在识别并切割双螺旋DNA分子内特定核苷酸顺序的酶统称为限制酶。 （1）限制酶命名： （三）第Ⅱ型限制酶的作用性质 1、基本特性： （1）识别位点为4~8个核苷酸序列； （2）识别位点即为切割位点； （3）位点上核苷酸顺序通常呈双重旋转对称结构，即呈回文结构。 切割方式通常有三种： ①在识别顺序两条链对称轴上同时切断磷酸二酯键，形成齐平末端。如HaeⅢ， PvuII。 ②在识别顺序两条链对称轴上两侧同时从5‘ 端切断磷酸二酯键，形成5‘ 磷酰基端2~5个核苷酸单链粘性末端。如EcoRⅠ。 ③在识别顺序两条链对称轴上两侧同时从3‘ 端切断磷酸二酯键，形成3‘羟基端2~5个核苷酸单链粘性末端。入PstⅠ。 第三节 基因工程载体（vector） 能将目的基因携带至宿主细胞