先天性巨结肠相关标志物的研究及临床意义.pdfVIP

摘要 摘 要 目的：利用免疫组化和实时荧光定量PCR 研究先天性巨结肠（HD ）不同节 段肠壁肠神经系统（ENS ）、平滑肌、肠间质细胞(ICCs)、组织蛋白酶D （CAD ） 及层粘连蛋白（LN ）的病理改变及病变范围，探讨HD 手术切除肠管范围、LN 与 HD 发病的关系等问题。 方法：以34 例手术切除 HD 标本为 HD 组，以 11 例死于与胃肠道或神经系 统无关疾病患儿结肠标本为对照组。分别行肠壁 S－100 蛋白 、α-平滑肌肌动蛋 白(α-SMA)、c －kit 蛋白、CAD、LN 免疫组化研究，观察两组的分布情况，另 取 HD 组标本行 LN 实时荧光定量 PCR ，观察其各段肠壁分布情况，并行统计学 处理。 结果：1.HD 组狭窄段、移行段 S－100 、α-SMA、c-kit 阳性表达与对照组 相比明显降低，扩张段上述指标逐渐增加。至扩张段 8cm 处，三者总体趋于正 常。 2.CAD 染色观察到自狭窄段向扩张段成熟神经节细胞逐渐增多，未成熟节 细胞逐渐减少。 3.LN 染色面积从狭窄段到正常段依次减弱，差异有统计学意义；LN 基因在 狭窄段的表达明显高于正常段，其表达水平由狭窄段向正常段递减。 结论：1.HD 组 ENS 、平滑肌和 ICCs 均存在病变，至扩张段 8cm 处病变缓 解。在患儿结肠长度允许的情况下，手术切除范围应达到或超过此范围。 2.CAD 染色可鉴别成熟与未成熟神经节细胞。 3.HD 中LN 的分布出现异常，是HD 发病的重要原因。 关键词：先天性巨结肠；肠神经系统；肠间质细胞；组织蛋白酶 D ；层粘 连蛋白 II 万方数据 Abstract ABSTRACT Objective: To provide theoretical basis for the length of bowel resection ， reveal the pathogenesis of Hirschsprung’s disease (HD) by investigating the pathological changes of enteric nerves system (ENS)、smooth muscle、 interstitial cells of Cajal (ICCs)、Cathepsin D(CAD) 、laminin (LN) in HD with immunochemically stained and real time quantitative PCR. Methods: Resected intestines were obtained from 34 patients with HD, eleven samples in the control group were obtained from postmortem neonates without gastrointestinal or nervous system diseases ． Imrnunohistoehemical staining for S-100 , -SMA 、c-kit 、CAD、LN was