Ghrelin对猪附植前胚胎影响及GHSR在猪、鼠附植前胚胎表达.pdfVIP

Anhui Agricultural University Master Degree Thesis Effects of Ghrelin on the Development of Pigs Preimplantation Embryos and the Expression of GHSR in Preimplantation Embryos of Pigs and Mice Postgraduate: Liu Xiaorui Academic supervisors: Prof. Zhang Xiaorong Assoc. Prof. Liu Ya College of Animal Science and Technology, Anhui Agricultural University, Hefei, 230036 Anhui, P.R. China June, 2013 本项研究受下列基金资助 1. 安徽省自然基金（090413088 ）； 2. 安徽农业大学青年基金“Ghrelin 对小鼠早期胚胎体外发育的 影响”； 3. 安徽省“长三角”项目（1201c0602007）； 4. 安徽省“创新试点省”项目（11Z0101095，12Z010244）。 SUPPOTED BY 1. Natural Science Foundation of Anhui Province ( Grant No. 090413088 ); 2. Foundation for Young Scholors of Anhui Agricultural University; 3. Yangzi River Delta Foundation of Anhui Province ( Grant No. 1201c0602007 ); 4. Innovation Pilot Foundation of Anhui Province ( Grant No. 11Z0101095 and 12Z010244）. 摘 要 已有的研究表明Ghrelin 与动物的生殖与发育密切相关，但目前关于Ghrelin 对哺乳动物附植前胚胎发育的调节研究较少，且不同研究小组的结果也不相一 致。本论文以猪孤雌胚为试验材料，研究不同浓度Ghrelin 添加剂对猪孤雌胚胎 早期发育的影响，并通过免疫荧光染色法与半定量 PCR 技术研究 Ghrelin 受体 ghsr 在猪孤雌激活（partheno-activated, PA ）胚、昆明小鼠体内受精胚胎、体外受 精 （In vitro fertilized, IVF ）胚和PA 胚不同发育阶段的表达水平，总结其在早期 胚胎发育中的表达规律，为阐明Ghrenlin 对哺乳动物早期胚胎发育的作用机制奠 定一定基础。研究分为以下两部分： 1．Ghrelin 对猪孤雌胚早期发育的影响： 将猪PA 胚培养于添加不同浓度( 0ng/ml （对照）, 0.1ng/ml, 1ng/ml, 10ng/ml 与100ng/ml )Ghrelin 的PZM3 培养液中，观察不同浓度Ghrelin 对猪PA 胚胎卵 裂率、囊胚发育率及胚胎发育速度的影响。结果发现：添加10 ng/ml Ghrelin 组 的 4-Cell 发育率、8-Cell 发育率、桑椹胚率及囊胚率均显著高于对照组和添加 0.1ng/ml 组（P0.05 ）；添加100 ng/ml 组的4-Cell 发育率、8-Cell 发育率均显著 高于添加0.1ng/ml 组（P0.05 ）；各组间（包括试验组与对照组）在卵裂率上无