骨髓间充质干细胞在重症急性胰腺炎大鼠的分布及对脑毛细血管渗漏干预效果的评价.pdfVIP

目 录 骨髓间充质干细胞在重症急性胰腺炎大鼠的分布及对脑毛细血管渗漏干预效果的评价 1 摘 要 1 Abstract 2 引 言 4 第一部分骨髓间充质干细胞原代、传代培养及鉴定 6 材料和方法 6 结 果 9 讨 论 11 第二部分骨髓间充质干细胞在重症急性胰腺炎大鼠的分布 12 材料和方法 12 结 果 15 讨 论 18 第三部分骨髓间充质干细胞移植对重症急性胰腺炎大鼠脑毛细血管渗漏干预效果的评价 19 材料和方法 19 结 果 28 讨 论 33 全文结论 37 参考文献 38 致 谢 42 综述 43 万方数据 骨髓间充质干细胞在重症急性胰腺炎大鼠的分布及对脑毛 细血管渗漏干预效果的评价 摘 要 背景：骨髓间充质干细胞具有多向分化和修复的特点，干预重症急性胰腺大鼠后，观 察其在重症急性胰腺炎大鼠的分布及对脑毛细血管渗漏干预效果的评价。 目的：骨髓间充质干细胞干预重症急性胰腺炎大鼠体后，观察其在重症急性胰腺炎大 鼠的分布，探讨骨髓间充质干细胞干预后对脑毛细血管渗漏的作用效果及其机制。 方法：直接贴壁法分离培养骨髓间充质干细胞，90%融合后消化传代扩增。传至第三 代后行细胞免疫表型鉴定，鉴定后适合的骨髓间充质干细胞用于干预重症急性胰腺炎 SD 大鼠。SD 雄性大鼠200g 72 只随机分为假手术组，重症急性胰腺炎组及骨髓间充质干细胞 干预组，各组动物又随即分成6h、12h、24h，3 个时相点，每个时相点8 只。制造重症急 6 性胰腺炎模型后1h，干细胞按2 ×10 /只尾静脉注入重症急性胰腺炎SD 大鼠体内，6、12、 24h 颈椎脱臼处死动物，取肝、肾、脑、肺、胰、肠脏器行快速冰冻切片，于荧光显微镜 绿色通道下观察，并在image pro-plus 软件分析下测量荧光灰度值。电镜观察重症急性胰 腺炎大鼠脑组织显微结构变化，观察胰腺病理变化及检测血清肿瘤坏死因子-a （TNF-a ）、 白介素- 1 （IL- 1）、AQP-4mRNA 表达水平变化。 结果：骨髓间充质干细胞传至第三代后具有其典型的细胞形态，并且符合BMSCs 细 胞其特有的表面抗原特征。由绿色荧光小鼠提取的骨髓间充质干细胞干预急性重症胰腺炎 SD 大鼠后，在胰腺、肠、肾、肝脏、肺脏中分布较多，而脑中分布较少。SAP 大鼠全身性 炎症反应，于损伤后24h 反应较明显， MSCs 能够调节SAP 大鼠的全身性炎症反应，抑 制炎症介质的过度释放，促进抗炎介质的分泌，减轻脑组织的免疫损伤，减轻脑毛细血管 渗漏，减轻脑水肿，干预移植MSCs 后对脑损伤有一定的治疗作用。 关键词：骨髓间充质干细胞，重症急性胰腺炎，干预，炎症因子，水通道蛋白-4 1 万方数据 The distribution of bone marrow mesenchymal stem cell in the severe acute pancreatitis rat various organs and the evaluation of intervention effect on cerebral capillary leak in rat brain