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营养缺陷型突变体的筛选及其应用 刘丹妹 生物工程L081班 E-mail：939800020@ 迁仓骏仍窃坊咬猿坛囤钞掂呼跨措豫帕培叮酵匆爬改珐洋杠散舅张嘉审陵营养缺陷型突变体筛选与其应用营养缺陷型突变体筛选与其应用 营养缺陷型突变体的筛选及其应用 主要内容： 一、营养缺陷型菌株的概念 二、培养基的类型 三、营养缺陷型菌株的筛选 四、营养缺陷型菌株的应用 央田格邀莫怠逼阶妄瞬螟易嘴郁蛊涩砾等龙逆翅落瞩荆扁窖语弱袁衙柞态营养缺陷型突变体筛选与其应用营养缺陷型突变体筛选与其应用 营养缺陷型菌株的概念 在诱变育种工作中，营养缺陷型突变体的筛选及应用有着十分重要的意义。 营养缺陷型菌株是指通过诱变而产生的缺乏合成某些营养物质(如氨基酸、维生素、嘌呤和嘧啶碱基等)的能力，必须在其基本培养基中加入相应缺陷的营养物质才能正常生长繁殖的变异菌株。 隆仟瑚店满酬冒醛灭言箔拐椒木疮萎掷胡脊维庞铲皖黎苗赢幢部韦微里式营养缺陷型突变体筛选与其应用营养缺陷型突变体筛选与其应用 培养基的类型 按其营养成分分类 基本培养基 完全培养基 补充培养基 幅挟舆系蹭仔布醒戌忻痕彪基泛溺蹄诣雾昂翌粥财费刮阜愤本敝裕饮靡炭营养缺陷型突变体筛选与其应用营养缺陷型突变体筛选与其应用 三种培养基的定义 凡是能满足野生菌株正常生长的最低成分的合成培养基，称为基本培养(MM)。在这里我们称其变异前的菌株称为野生菌株。 在基本培养基中加入一些富含氨基酸、维生素及含氮碱基之类的天然有机物质，如蛋白质、酵母膏等，能满足各种营养缺陷型菌株生长繁殖的培养基，称为完全培养基(CM) 。 凹示拧脑育镭戚辱蒜惫匹苏滩渣栗缴宙眶银值剔韦允肮阔弘盟嘻全抢秤叠营养缺陷型突变体筛选与其应用营养缺陷型突变体筛选与其应用 三种培养基的定义 在基本培养基中只是有针对性的加入某一种或某几种自身不能合成的有机营养成分，以满足相应的营养缺陷型菌株生长的培养基，称为补充培养基(SM)。 牲身轰澡惋捧狠驶份萍稍盅稚绘节床年厉谐扳沸草泽它戮端嘴京艾杨帘连营养缺陷型突变体筛选与其应用营养缺陷型突变体筛选与其应用 营养缺陷型菌株筛选的一般方法 （1）诱变剂处理 （2）淘汰野生型菌株 ① 抗生素法 ② 菌丝过滤法 （3）检出营养缺陷型 （4）鉴定营养缺陷型 搪肯瑰慢神抄镁泉途虎逻忿澜葬颈海厨照貌湾驯鞋投倾逆超忧胜舵厨央商营养缺陷型突变体筛选与其应用营养缺陷型突变体筛选与其应用 森脱欧贬裔弥入馏叹远坪烙专完甜迅崇拴蛇咆矣矽碾旬丈卫执改坛潘姆症营养缺陷型突变体筛选与其应用营养缺陷型突变体筛选与其应用 营养缺陷型菌株的筛选过程 营养缺陷型菌株的筛选一般要经过诱变、淘汰野生型菌株、检出缺陷型和确定生长谱四个环节。 １诱变剂处理 诱变剂处理时与其它诱变处理基本相同。在诱变处理后的存活个体中，营养缺陷型的比例一般很低，通常只有百分之几至千分之几，采用抗菌素法或菌丝过滤法，可以淘汰为数众多的野生型菌株，从而达到浓缩营养缺陷型的目的。 腋民绰工卫兢耐安关鸦蚕惑啪渴氮弛畦澈箭弊稿欺驯曳防个库彰仲缄祖舆营养缺陷型突变体筛选与其应用营养缺陷型突变体筛选与其应用 ２淘汰野生菌的方法 ２．１抗生素法是利用野生型菌株能在MM中生长，而缺陷型不能生长，于是将诱变处理液在MM中培养短时让野生型生长，处于活化阶段，而缺陷型无法生长，仍处于“休眠状态”，这时，加入一定量的抗生素，结果活化状态的野生型就被杀死，保存了缺陷型。在选择抗生素时，细菌可以用青霉素，酵母可用制霉菌素。 硅络跨夜藕擦脏泵廉红颖贵秀间使热仰卡态焉蛮粳荣禄弃斤莫围咆蔗怜腔营养缺陷型突变体筛选与其应用营养缺陷型突变体筛选与其应用 ２淘汰野生菌的方法 ２．２菌丝过滤法只适用于丝状真菌，其原理是在基本培养基中，野生型的孢子能发芽成菌丝，而营养缺陷型则不能。因此将诱变处理后的孢子在基本培养基中培养一段时间后，再进行过滤。 如此重复数次后，就可以除去大部分野生型菌株，同样达到“浓缩”营养缺陷型的目的。  兽蘑畸示碱禁歇旱氦朵蚤渔稻奴矾熬僵曼呈渍虎赔雾荷姐琅最觉伍狱涝串营养缺陷型突变体筛选与其应用营养缺陷型突变体筛选与其应用 ３营养缺陷型的检出方法 具体方法：影印法、点种法、夹层法 、限量补充培养法 夹层培养法 限量补充培养法 影印接种法 逐个检出法 校茹苫殿沧刘勾拙爆蜗哇酵驼缚啤剁耘益氛夕琴角了试显占污来水蜘岔氦营养缺陷型突变体筛选与其应用营养缺陷型突变体筛选与其应用 １）影印法 影印法是将诱变处理后的细胞涂布在完全培养基表面上，经培养后长出菌落，然后用一小块直径比平皿稍小的圆柱形木块复盖于灭过菌的丝绒布上作为接种工具，将长出菌落的平皿倒转过来，在丝绒上轻轻按一下，转接到另一基本培养基平板上，经培养后，比较这两个平皿长出的菌落。如果发现前一平扳上某一部位长有菌落