微管和中间纤维.PPT

第九章 细胞骨架(Cytoskeleton) 第一节 细胞骨架的概述 ◆细胞骨架概念 细胞骨架是指存在于真核细胞的细胞质中的蛋白纤维网架结构体系 ◆有狭义和广义两种涵义 ?在细胞质基质中包括微丝、微管和中间纤维。 ?在细胞核中存在核骨架-核纤层体系。核骨架、 核纤层与中间纤维在结构上相互连接,贯穿于 细胞核和细胞质的网架体系。 细胞 骨架 微丝：确定细胞表面的特征，并使细胞完成运动和收缩； 微管:确定膜性细胞器的位置和作为膜内物质运输的“高速公路”网络； 中间纤维：赋予细胞张力和抗剪切力 ◆细胞骨架主要功能的概述 ?作为动态的支架，提供结构支撑以决定细胞形状和抵抗细胞变形。 ?作为在细胞内定位各种细胞器的内部框架。 ?作为高速公路网指导物质与细胞器在细胞内的运动。 ?作为产生力的装置，将细胞从一个地方移至到另一个地方,细胞的运动功能的实现都与细胞骨架有关。 ?作为锚定mRNA并促进其翻译成多肽的位点。 ?作为细胞分裂的必要组分,细胞骨架成分组成的细胞器负责牵引染色体的分离，并将亲代细胞分成两个子代细胞 。 二、细胞骨架的遗传学方法研究 采用突变的方式来研究细胞骨架蛋白的功能。 （一）过量表达显性失活突变蛋白 显性失活的基因转染→筛选阳性克隆→使突变蛋白过量表达→突变蛋白与正常蛋白（表达量低）竞争→细胞表现出突变蛋白的表型→确定目的蛋白的功能 例：显性失活的驱动蛋白Ⅱ（kinesin Ⅱ）即使在激素刺激下，也是非洲爪蟾不能分泌色素颗粒，说明驱动蛋白Ⅱ负责色素颗粒的运输和分泌。 （二）实验动物的基因敲除 基因敲除技术：使动物缺乏特定的基因，研究特定基因敲除后的效应。有些基因敲除后小鼠可能出现高度特异性的缺陷，说明敲除的基因在缺陷涉及的活动中具有重要的作用。 例：敲除细胞质中动力蛋白(dynein)的小鼠在出生后8天死亡，研究其胚胎细胞发现高尔基体发生断裂，分散在细胞质中，说明动力蛋白是高尔基体在细胞内正确定位的必需分子。 第二节 微丝 又称肌动蛋白纤维(actin filament), 是指真核细胞中由肌动蛋白(actin)组成、直径为7nm的骨架纤维 成 分 ●肌动蛋白(actin) 是微丝的主要结构成分,外观呈哑铃状, 这种actin又叫G-actin，将G-actin形成的微丝又称为F-actin。存在于所有真核细胞中,在真核细胞进化过程中高度保守。在细胞内与几乎所有形式的运动相关。 一、微丝(microfilament, MF) 又称肌动蛋白纤维(actin filament), 是指真核 细胞中由肌动蛋白(actin)组成、直径为7nm的骨架纤维。 ●成分 ●装配 ●微丝结合蛋白 ●微丝特异性药物 ●微丝功能 ●肌肉收缩(muscle contraction) 一、微丝的分子结构 成分：肌动蛋白(actin) 是微丝的主要结构成分,外观呈哑铃状, 这种actin又叫球形肌动蛋白（G-actin），将G-actin形成的多聚体称为纤维形肌动蛋白（F-actin）。存在于所有真核细胞中,在真核细胞进化过程中高度保守. 装 配 ◆ATP-肌动蛋白对微丝纤维末端亲和力高，ADP-肌动蛋白对纤维末端亲和力低，容易脱落 ◆ MF是由G-actin单体形成的多聚体，肌动蛋白单体具有极性, 装配时呈头尾相接, 故微丝具有极性，既正极与负极之别。 ◆ 体外实验表明，MF正极与负极都能生长，生长快的一端为正极，慢的一端为负极；去装配时，负极比正极快。由于G-actin在正极端装配，负极去装配，从而表现为踏车行为。 ◆ 两条F-肌动蛋白链螺旋盘绕形成微丝（或1条形成的螺旋链） ◆ 微丝有些是永久性的结构（如肌原纤维、微绒毛等）,有些是暂时性的结构，处于动态的装配和解聚过程中。 ◆体内肌动蛋白的装配在两水平受到结合蛋白的调节:1、ATP-肌动蛋白单体的浓度；2、微丝连接成束或成网的程度。 微丝特异性药物 ◆细胞松弛素(cytochalasins)：可以切断微丝,并结合在微丝正极阻抑肌动蛋白聚合,因而导致微丝解聚。 ◆鬼笔环肽(philloidin)：与微丝侧面结合,防止MF解聚。只与F肌动蛋白结合，不与G肌动蛋白结合。使微丝纤维稳定而抑制其功能 ◆影响微丝装配动态性的药物对细胞都有毒害，说明微丝功能的发挥依赖于微丝与肌动蛋白单体库间的动态平衡。这种动态平衡受actin单体浓度和微丝结合蛋白的影响。 二、微丝结合蛋白 微丝系统=肌动蛋白纤维+微丝结合蛋白。 肌动蛋白纤维的组织和行为需要与微丝结合的其他蛋白的相互作用，这些蛋白可协助完成肌动蛋白纤维的装配和解