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呋喃唑酮代谢物单克隆抗体制备及酶联免疫吸附分析
( )
第 40 卷 分析化学 FENXI HUAXUE 研究 第期
2012 年月 Chinese Journal of Analytical Chemistry ~
: /
DOI 10.3724SP.J.1096.2012.10409
呋喃唑酮代谢物单克隆抗体制备及酶联免疫吸附分析方法
任海涛 沈玉栋 徐振林 杨金易 雷红涛 肖治理 王 弘 孙远明*
( , , )
广东省食品质量安全重点实验室 华南农业大学食品学院 广州 510642
( ), , ( )
摘 要 本研究针对呋喃唑酮代谢物 AOZ 设计合成了系列半抗原 进一步通过偶联牛血清白蛋白 BSA
、 、 (
免疫 Balb/c 小鼠 细胞融合 筛选和亚克隆等过程成功获得了源于新颖半抗原 H3 的具有高亲和力 亲和力常
10 ) ( ) 。 ,
数 6.68 ×10 L/mol 和高特异性 与其它功能类似物交叉反应小于 0.1% 抗 AOZ 单克隆抗体 同时 基于设计
, 。 ,
合成的系列同/异源半抗原/包被抗原 考察了不同结构包被原对 ELISA 方法灵敏度的影响 另外 采用最佳
, ( ) ( )
的特征结构异源包被原 H5 OVA 建立了以对硝基苯甲醛 p NP 为衍生剂的AOZ 间接竞争 ELISA icELISA
- -
( ) 。 : ,
和直接竞争ELISA dcELISA 检测方法 结果表明 icELISA 模式的AOZ 检测IC50 为0.503 mg/L 定量检测线性
( ) , ( ) ; ,
范围 IC20 ~IC80 为 0.060~13.95 mg/L 检出限 IC10 达 0.017 mg/L dcELISA 模式的AOZ 检测 IC50 为 1.189 mg/L
, 。
定量检测线性范围为 0.143~23.57 mg/L 检出限为 0.056 mg/L 两种方法对 AOZ 的检测灵敏度和定量线性范
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