羟基磷灰石聚乳酸微粒复合生物支架的体外细胞相容性评价.pdfVIP

第38 卷 分析化学 (FENXI HUAXUE) 研究报告 第 12 期 2010 年 12 月 Chinese Joumal of Analytical ChemislIγ 1754 句 1758 DOI: 10.3724/SP. J.IO%. 2010. 01754 瓷基磷灰石/聚乳酸微粒复合生物支架的体外细胞相容性评价 徐文峰* 廖晓玲 (重庆文理学院化学与环境工程学院，重庆402160) (重庆科技学院冶金与材料工程学院，重庆401331 ) 摘要利用溶液共棍法以及溶剂挥发法制备了起墓磷灰石(Nano-HA)/聚乳酸(PLA) 微粒，再粘结微粒加 工成三维多孔 Nano-HAlPLA 微粒复合生物支架。借助相差思微镜、扫描电子显微镜和 Mπ法检测了鼠骨髓 基质细胞(BMSCs) 在该支架材料上的生长情况，通过细胞形态学观察和细胞增殉情况评价了该复合生物支 架材料的生物相容性。结果表明， SEM 观察到支架材料t培养细胞4d 后，细胞主要附着、铺展在支架的低 洼处或孔洞处表面，并向孔洞深部沿壁生长;在支架材料上培养细胞8 d 后，细胞多为梭形形态，并有许多生 长角，直接贴附于支架的微粒表面，开始连片生长，有明显的增值，各组没有变形、坏死现象。支架材料上培养 细胞2 ， 3 ， 4 ， 5 ， 6 和8 d 的 MTI 检测表明，各实验组 RGR 均达到 1 ∞%以上，细胞毒性为0 级;细胞在支架材 料上的生长曲线显示，实验组细胞活力比对照细高 26% 0 因此，该 Nano-HA/PLA 微粒复合生物支架没有细 胞毒性，并对细胞有良好的粘附和增殖能力，为较具潜力的骨修复材料。 关键词 经基磷灰石/聚乳酸微粒;多孔支架;生物相容性;细胞毒性 1 引言 近年来，生物降解细胞微载体由于其特殊的球形立体结构不仅可以作为细胞的高密度培养微载体， 也可以作为组织工程中的可注射型细胞载体用于对组织和器官缺损的修复和再生[1] 。同时，这种微粒 还可以粘结成多孔硬支架，通过控制微球的尺寸可控制孔的大小，并克服了带孔支架的连通问题;同时， 微粒体系形成的支架也给细胞的生化反应提供了更多的表面积。因此，微粒体系形成的支架既能用于 无细胞支架制造策略，还能用于离体组装细胞，而创造细胞-材料杂化构造体，在生物医学组织士程领域 具有很大的应用潜力[2 叫。 聚乳酸(PLA) 是一种具有良好生物相容性和生物降解性的聚合物，被广泛用于组织工程中支架材 料和药物载体材料;短基磷灰石(HA) 是自然骨结晶部分的主要成分，具有良好的生物相容性和骨传导 作用，可以引导骨的生长，并与骨组织形成牢固的骨性结合，是公认性能良好的骨修复替代材料。二者 都具有优异的生物相容性、生物可降解性和生物活性问。本研究采用溶液共混法以及洛剂挥发法将纳 米起基磷灰石(Nano-HA) 和 PLA 复合制备成 Nano-HAlPLA 微颗粒，再粘结微粒制备出的 Nano-HAI PLA 多孔微粒体系支架材料。开发的 Nano-HAlPLA 微粒复合生物支架的制造工艺在相关材料研究方 面[6.7]具有创新性，有望成为理想的骨细胞微载体。 医用植入体的成功与否常常取决于器件植入后细胞与材料表面的相互作用[8.9] 。对于骨缺损修复 的支架材料研究而言，材料的细胞相容性评价是其中重要的一个环节。为此本研究选择鼠骨髓基质细 胞( Bone marrow stromal cells , BM5Cs) 作为细胞模型，检测 Nano-HAlPLA 微粒复合生物支架材料的细 胞生物学响应，为骨组织工程中生物材料的选择提供实验依据。 2 实验部分 2.1 仪器与试剂 BD5200-PH 倒置相差显微镜(上海倍曼生物科技有限公司) ;GHP-9050 数匾隔水恒温培养箱(上海 浦东荣丰公司) ;带 EDAX 能谱仪 534∞N 型扫描电镜(日本日立公司) ; Mode1550 酶标仪(美国 Bio-Rad 2010-04-15 收稿; 201O-{)6-28 接受 本文系重庆市教委自然科学基金(No: KJ081205 ， No: 阳091213) 资助项目 * E-m